产品简介

 

翌圣生产的Cas9核酸酶来源于S. pyogenes，是依赖于RNA介导的内切核酸酶，可以特异地切割双链DNA（在DNA PAM存在的情况下，也可以切割单链DNA或单链RNA）。Cas9切割位点位于目标序列（target sequence）内，离PAM（NGG）区3个碱基。PAM对于Cas9的识别和切割都是必需的。因为反应需要添加RNA（sgRNA或者crRNA:tracrRNA），整个体系，包括Cas9酶都必需不含任何核酸酶。

 

组分信息

 

组分编号	组分名称	11350ES65	11350ES80
11350-A	Cas9 Nuclease（10 μM*）	100 pmol	1000 pmol
11350-B	10× Cas9 Nuclease Reaction Buffer	1 mL	1 mL

*：Cas9 Nuclease浓度为10 μM，即10 pmol/μL，100 pmol规格总体积为10 μL，1000 pmol总体积为100 μL。

 

储存条件

 

-25~-15℃储存，有效期2年。

 

使用说明

 

在无菌微量离心管中配制以下反应体系：

组分	30 μL反应体系
Nuclease-free water	20 μL
10 X Cas9 Nuclease Reaction Buffer	3 μL
300 nM sgRNA	3 μL (30 nM final)
1 μM Cas9 Nuclease	1 μL (~30 nM final)
Reaction volume	27 μL
Pre-incubate for 10 minutes at 25⁰C
30 nM substrate DNA	3 μL (3 nM final)
Total reaction volume	30 μL
Incubate at 37 °C for 1 hour and proceed with fragment analysis

 

 

注意事项

 

1. 为防止RNase污染，请保持实验区干净整洁，操作时需穿戴干净的手套、口罩，实验所用枪头、离心管等耗材均为 RNase-free。
2.  因反应需添加RNA(sgRNA或者crRNA : tracrRNA)，整个体系，包括Cas9酶都必需不含任何RNase活性。本产品经过严格质控，无任何其它核酸酶污染。
3. Cas9酶对热敏感，容易失活，应全程冰上配置反应体系，使用后立即置于-20℃保存。
4. 本产品仅作科研用途。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

 

Ver.CN20240105