氨基酸球菌来源的Ascpf1是依赖于RNA介导的内切核酸酶,在靶标DNA存在PAM的情况下,可特异地切割靶标双链DNA。Cpf1蛋白有诸多优点:(1)Cpf1只需要单个crRNA,且体积更小、更易被递送至细胞中;(2)Cpf1切割后产生粘性末端,更利用基因组精确编辑;(3)Cpf1的切割位点远离其识别位点,为连续多次编辑提供了可能性;(4)Cpf1识别的PAM序列与Cas9不同,可提供不同编辑位点的选择。
产品组成
产品编号 |
组分名称 |
产品货号(规格) |
|
11352ES65 |
11352ES78 |
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11352-A |
Ascpf1(Cas12) Nuclease |
100 pmol |
500 pmol |
11352-B |
10× Ascpf1 Nuclease Reaction Buffer |
1 mL |
5 mL |
11352-C |
Control Target DNA |
2 rxns |
10 rxns |
11352-D |
crRNA |
2 rxns |
10 rxns |
运输与保存方法
干冰运输。-80ºC保存,2年有效。
注意事项
1) sgRNA容易降解,保存于-80ºC;其余组分可保存-20ºC。
2) 本产品仅作科研用途!
使用方法
在无菌微量离心管中配制以下反应体系:
组分 |
体积 |
10×Ascpf1 Reaction Buffer |
3 μL |
300 nM crRNA |
3 μL (30 nM final) |
1 μM Ascpf1 Nuclease |
1 μL (~30 nM final) |
Reaction volume |
27 μL |
30 nM substrate DNA |
3 μL (3 nM final) |
Nuclease-free water up to |
30 μL |
Incubate at 37 °C for 1 h, then 85 °C 10 min to inactivate Cpf1, followed by agarose gel electrophoresis for fragment analysis |
相关产品
产品名称 |
货号 |
规格(pmol) |
11350ES65/78 |
100/500 |
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11351ES65/78 |
100/500 |
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11352ES65/78 |
100/500 |
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11353ES65/78 |
100/500 |
|
11354ES65/78 |
100/500 |
HB210720