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GMyc-PCR Mycoplasma Detection Kit (2G) 支原体PCR检测试剂盒(巢式PCR)(2G)
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产品介绍

支原体PCR检测试剂盒(巢式PCR)(2G)是基于巢式PCR法(NestedPCR)对各种生物材料(如细胞培养物、实验动物分泌物和动物血清等)支原体感染的检测。该试剂盒采用定量PCR技术,针对支原体16S-23S rRNA序列保守区域设计两套引物,进行两轮PCR扩增,以第二轮扩增产物为准进行支原体污染情况判断。其可检出包括口腔支原体(M.orale)、肺炎支原体(M.pneumoniae)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)、精氨酸支原体(M.arginini)、鸡败血支原体(M.gallisepticum)、关节液支原体(M.synoviae)、发酵支原体(M.fermentans)、柠檬螺原体(Spiroplasma citri)、唾液支原体(M.salivarium)等在内的共34种支原体,灵敏度可达2.5 copies/uL,对于10 CFU/mL支原体标准菌株也可正常扩增有条带,具备特异性强、灵敏度高、操作方便快速等特点,可直接用于细胞培养上清液的检测。

本产品相较于常规PCR法支原体检测试剂盒,可避免由于引物与模板之间的非特异配对,导致非特异性产物的产生;还可灵敏的检测到样本中微量的支原体DNA,避免假阴性的产生。

产品特色

检测种类多:优化的巢式PCR技术可检测多达34种支原体;

• 专属性强:针对16S-23S rRNA设计引物探针,不与梭菌、乳杆菌等亲缘物种交叉反应;

• 灵敏度高:检测限可低至2.5 copies/μL;

• 操作简便:样本制备和检测总时长可短至2h以内;

• 安全性高:试剂盒内阳性对照(PC)无感染性,完全消除污染风险。

应用案例

检测限

1、本试剂盒第一轮PCR扩增产物灵敏度为1x103 copies/μL:

2、本试剂盒第二轮PCR扩增产物灵敏度为2.5 copies/μL:

专属性

1、检测范围:本2G版本巢式PCR支原体检测试剂盒检测了中外药典要求的10CFU/mL灵敏度的共8种支原体,均可检出。

PS:药典要求的支原体灭活菌株DNA模板浓度为10CFU/mL,鸡败血支原体、莱氏无胆甾原体由于样本不足未检测


组号
样本名称(英文)
中文名称是否检出
1Mycoplasma fermentans
发酵支原体
√
2Mycoplasma citri
柠檬螺原体
√
3Mycoplasma hyorhinis
猪鼻支原体
√
4Mycoplasma pneumoniae
肺炎支原体
√
5Mycoplasma orale
口腔支原体
√
6Mycoplasma synoviae
关节液支原体
√
7Mycoplasma arginini
精氨酸支原体
√
8Mycoplasma salivarium
唾液支原体
√
9PC
阳性对照
√
10NTC
阴性对照
×

2、样本基质干扰:选取了14种常见样品基质和试剂盒中的阳性对照及其加标(2.5copies/μL阳性对照)、阴性对照(PCR Mix)做验证,14种基质均未检出支原体。

加样顺序样本名称加样顺序样本名称
1MEM(1×)9RPMI medium
2MCDB 13110L-15 LEIBOVITZ MEDIA
3F-1211NUTRIENT MIXTURE-F-12 HAM'S
4IMDM12RPMI Medium Modified
5BME13Medium 199/EBSS
6McCoy's 5A medium14DMEM/LOW GLUCOSE
7DMEM15阳性对照
8opti-MEM16NTC


存储条件

干冰运输,-25~-15℃保存,有效期1年。

*整个试剂盒若较长时间不用,请避光保存。其中40614-C长期不用时,可-85~-65℃冷冻保存。

COA
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