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翌圣带您了解IHC免疫组化实验流程

 

免疫组化,应用免疫学基本原理(抗原与抗体特异性结合的原理),通过化学反应使标记抗体显色剂荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。是表象和抽象完美结合的技术。

翌圣生物IHC全系列产品为您的IHC实验保驾护航,助您获取文献级IHC图像的旅途一帆风顺。今天,小翌带您详细了解下我们为您的IHC实验中关键步骤所准备的试剂及注意点,助您完美躲坑。

 

 

样品制备
 

石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法,对于组织形态保存好,但对组织内抗原暴露有一定的影响,我司为您准备的改进型柠檬酸钠抗原修复液(Cat#36319)能够更有效去除因使用多聚甲醛、甲醛等醛类试剂固定后导致蛋白间的交联,并充分暴露样品中的抗原表位,从而改善免疫染色效果,获得的染色信号更强,背景更低。

但如果您对组织形态没有那么在意,需要较快得到切片,那推荐您使用我司的OCT冰冻切片包埋剂(Cat#36309),助您得到高质量的冰冻切片。
 

产品详情

产品名称

产品编号

规格

目录价/元

OCT冰冻切片包埋剂

36309ES61

118 mL

218

Improved Antigen Retrieval Buffer (50× Citrate Sodium Buffer, pH 6.0)
改进型柠檬酸钠抗原修复液(50×)

36319ES60

100 mL

165

 

背景封闭
 

组织中内源性酶和抗体的封闭对于背景染色的最小化以及降低假阳性染色十分重要。我司给您准备好了各种动物的正常血清(Cat#36116-Cat#36119)用于封闭,效果绝佳。
 

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产品编号

规格

目录价/元

Normal donkey serum 正常驴血清

36116ES10

10 mL

800

Normal rabbit serum 正常兔血清

36117ES08

5 mL

480

Normal mouse serum正常小鼠血清

36118ES08

5 mL

704

Normal goat serum 正常山羊血清

36119ES08

10 mL

800

 

抗原抗体结合
 

抗体的选择,选择已通过验证可用于免疫组化(IHC)应用的一抗,来识别靶点;即可选择直接带有偶联物的一抗又可以利用普通的一抗识别靶点,然后再利用带有偶联物的二抗进行识别一抗。

选择抗体需要确认一下重要信息。

一抗:

1. Antigen(抗原名称):英文全称、简称都提供, 中文最好也提供

2. Reactivity(反应性):实验用于什么物种, 是人, 大鼠还是小鼠等

3. Applications(应用):已通过验证可用于免疫组化(IHC)。

二抗:

1. Host(一抗名称,种属来源) 

2. Conjugate(标记物):抗体是酶标记还是荧光标记,还是其他。

另外小翌还为您准备了免疫组化笔(Cat#36310),可帮您在不影响实验结果的前提下有效减少抗原抗体的使用量,并避免表面试剂流失造成的干片、脱片。 
  

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产品编号

规格

目录价/元

Peroxidase-Conjugated Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)

 过氧化物酶标记山羊抗兔IgG(H+L)

33101ES60

100 µL

195

Alkaline Phosphatase AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) 碱性磷酸酶标记山羊抗兔IgG(H+L)

33102ES60

100 µL

298

Biotin-SP AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) 

生物素标记山羊抗兔IgG(H+L)  

33103ES60

100 µL

228

Peroxidase-Conjugated Goat Anti-Mouse IgG (H+L) 过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG(H+L)

33201ES60

100 µL

195

Alkaline Phosphatase AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG (H+L) 碱性磷酸酶标记山羊抗小鼠IgG(H+L)

33202ES60

100 µL

298

Biotin-SP AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG (H+L) 

生物素标记山羊抗小鼠IgG(H+L)

33203ES60

100 µL

228

ImmHisTM Hydrophobic Barrier Pen

ImmHisTM 免疫组化笔(疏水屏障)

36310ES64

1支

562

                   

显色、封片
 

以上工作结束,终于到了最后显色的环节(决定图像是否好坏的直接环节),小翌给您准备了4款不同颜色的显示试剂盒(Cat#36301-Cat#36304),给您的图像标上您想要的颜色。用中性树胶(Cat#36313)封片,永久性保存您的辛苦劳作。
 

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产品名称

产品编号

规格

目录价/元

BCIP/NBT Alkaline Phosphatase (AP) Substrate Kit for IHC  BCIP/NBT显色试剂盒(蓝紫色,IHC)

36301ES01

1 Kit

397

DAB Peroxidase Substrate Kit for IHC (Yellow Color)  DAB显色试剂盒黄色(IHC)

36302ES01

1 Kit

295

DAB Peroxidase Substrate Kit for IHC (Blue Color)

DAB显色试剂盒蓝色(IHC)

36303ES01

1 Kit

295

AEC Peroxidase Substrate Kit for IHC (Red Color)

AEC显色试剂盒红色(IHC)

36303ES01

1 Kit

187

Neutral Balsam, Mounting Medium for Microscopy

中性树胶(镜检用永久封片剂)

36313ES60

100 mL

156

                                    

小翌还想偷偷告诉您
 

为了让您有更好的操作体验,给您备好了免疫组化试剂盒(Cat#36311-Cat#36312),包含以上操作所需的所有试剂(您只需准备好您要检测的一抗即可)。让您的实验不仅好,而且省心。
 

 产品详情

产品名称

产品编号

规格

目录价/元

Immunohischemistry Kit for Mouse Primary Antibody 

小鼠免疫组化(IHC)检测试剂盒

36311ES50

100 T

1256

Immunohischemistry Kit for Rabbit Primary Antibody

兔免疫组化(IHC)检测试剂盒

36312ES50

100 T

1186

 

400-6111-883