面对突发性、传染性强、不明病因的疾病，需要可靠、快速手段锁定病原。毫无疑问，mNGS将病原一网打尽并在24h内出具报告，成为病原检测的一把利剑。mNGS不需要培养，直接对样本核酸进行高通量测序，能够快速、无偏差的检测临床样本中的全部病原。其检测流程可以分为5个步骤：核酸提取、文库构建、上机测序、生信分析与报告解读。

mNGS检测流程图
 

 

翌圣 mNGS湿实验完整解决方案
 

宏基因组建库性能

主推产品：Hieff NGS® OnePot II DNA Library Prep Kit for Illumina®（Cat#13490）

产品特点：

1）起始兼容广：适用500pg-1μg的gDNA、全长cDNA等样本

2）操作简单：片段化/末修/加A一步完成，建库时间低至3h

3）极低背景：工艺优化，严苛质检，背景菌残留低，特别适合病原建库

产品性能：

1）建库性能：不同批次13490试剂盒，酶切 4℃1min；30℃ 20min；72℃ 20min；4℃ Hold，结果表明，不同类型样本，不同投入量情况下，均能建库成功

表1、不同样本、不同起始量样本文库产出

图1、不同样本、不同起始量样本文库大小
 

2）背景残留：两个批次13490试剂盒（C、S），小牛胸腺DNA，500 pg、1μg Input 酶切时间20min，14cycles，illumina，PE150，20M reads/样，结果表明，两个批次背景菌残留菌较低，批次间稳定建较好

图2、两个批次试剂500 pg、1μg Input背景菌残留结果
 

产品详情

分类		产品名称	产品编号	规格
DNA建库	机械法建库	Hieff NGS® Ultima DNA Library Prep Kit for Illumina®	12199ES08/ES24/ES96	8 T/24 T/96 T
		Hieff NGS® Ultima DNA Library Prep Kit for MGI®	13310ES16/ES96	16 T/96 T
	酶切法建库	Hieff NGS® OnePot Ⅱ DNA Library Prep Kit for Illumina®	13490ES08/ES24/ES96	8 T/24 T/96 T
		Hieff NGS® OnePot II DNA Library Prep Kit for MGI®	13509ES16/ES96	16 T/96 T
	酶切PCR-free建库	Hieff NGS® OnePot Pro PCR-Free DNA Library Prep Kit for Illumina®	12209ES08//ES24/ES96	8 T/24 T/96 T
	转座酶建库	Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®	12206ES08/ES24/ES96; 12207ES08/ES24/ES96	8 T/24 T/96 T; 8 T/24 T/96 T

 

宏转录组建库性能

主推产品：Hieff NGS® Fast RNA Library Prep Kit for Illumina®(Cat#12304)

产品特点：

1) 起始兼容广：10~500 ng RNA建库

2) 极速建库：将传统约3.5h建库时间缩短到3 h

3) 极低背景：工艺优化，严苛质检，背景菌残留低，特别适合病原建库

产品性能：

1）Control为12253+12252（常规RNA建库），不同起始量293 RNA 为样本建库测序，结果表明，不同起始量文库产出、基因表达数量检出均正常

表2、不同起始量RNA文库产出

图3、不同起始量RNA建库基因表达数量

 

2）不同起始量293 RNA ，illumina，PE150，20M reads，结果表明，大肠残留均较低

图4、不同起始量ENA建库，大肠残留检测

 

产品详情

分类		产品名称	产品编号	规格
RNA建库	rRNA去除/珠蛋白去除	Hieff NGS® One-Step rRNA Remova Kit/Hieff NGS® One-Step Globin mRNA Removal Kit(Human)	12258ES08//ES24/ES96 12259ES08//ES24/ES96 12260ES08/ES24/ES96	8 T/24 T/96 T; 8 T/24 T/96 T; 8 T/24 T/96 T
	常规RNA建库	Hieff NGS® Ultima Dual-mode RNA Library Prep Kit for Illumina®	12252ES08/ES24/ES96	8 T/24 T/96 T
		Hieff NGS® Ultima Dual-mode RNA Library Prep Kit for MGI®	13333ES08//ES24/ES96	8 T/24 T/96 T
	极速RNA建库	Hieff NGS® Fast RNA Library Prep Kit  for Illumina®	12304ES08/ES24/ES96	8 T/24 T/96 T

 

RNA&DNA共建库性能

主推产品：Hieff NGS® ds-cDNA Synthesis Kit（Cat#13488)

Hieff NGS® OnePot cDNA&gDNA Library Prep Kit（Cat#13502）

产品特点：

1) 起始兼容广：500pg-1μg RNA、DNA均能建库成功

2) 模块自由组合：Cat#13502可进行DNA建库，搭配Cat#13488可进行DNA&RNA共建库，模块灵活搭配，经济便捷

3) 极速建库：3h内完成共建库

产品性能：

1）建库性能

不同起始量标准品RNA、小牛gDNA进行建库测序，500pg-1μg RNA、DNA均能建库成功
 

表3、不同gDNA投入文库产出

 

表4、不同RNA投入文库产出

 

2）背景残留

表5、不同gDNA投入背景残留

 

表6、不同RNA投入背景残留

 

产品详情

分类		产品名称	产品编号	规格
DNA&RNA共建库	RNA一、二链合成	Hieff NGS® ds-cDNA Synthesis Kit	13488ES08/ES24/ES96	8 T/24 T/96 T
	Illumina&MGI DNA建库	Hieff NGS® OnePot cDNA&gDNA Library Prep Kit	13502ES08/ES24/ES96	8 T/24 T/96 T

 

tNGS多重扩增试剂

主推产品：Hieff® HG Multiplex PCR Master Mix Library Prep Kit (Cat#13283）

产品特点：

1) 性能优：高均一性、高特异性和高灵敏度

2) GC兼容广：兼容GC含量在25%-70%

3) 性能优：高均一性、高特异性和高灵敏度

4) 操作简洁：预混液包含除引物和DNA模板之外所有组分

产品性能：

YS自设panel 35对GC 70-80；95对GC 27-72.5； 130对GC 27-80，和竞品A、B测序比较，结果显示，GC含量在25%-70%左右基因区域均得到稳定扩增、均一性优于竞品
 

表7、不同GCpanel扩增测序结果

图5、不同GC覆盖结果

 

产品详情

分类		产品名称	产品编号	规格
tNGS（多重PCR）建库	扩增Mix	Hieff® HG Multiplex PCR Master Mix Library Prep Kit	13283ES03/ES08/ES50/ES60/ES76	1 mL/5×1 mL/50 mL/250 mL/500 mL

 

建库必备

分类		产品名称	产品编号	规格
接头	长接头	Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®	13519ES04/ES16；13520ES04/ES16	48×4 T/48×16T; 48×4 T/48×16T
		Hieff NGS® Complete Adapter Kit for MGI®	13360ES02/ES04/ES96; 13361ES02/ES04/ES96; 13362ES02/ES04/ES96	8×2 T/8×4 T/8×100 T; 16×2 T/16×4 T/16×100 T; 96×2 T/96×4 T/96×100 T
	短接头	Hieff NGS® 384 CDI Primer for Illumina®	12412ES02； 12413ES02	96×2 T; 96×2 T
		Hieff NGS® Unique Dual Index Primer Kit for MGI®	13451ES02/ES04; 13452ES02/ES04; 13453ES02/ES04; 13454ES02/ES04;	48×2 T/48×4 T; 48×2 T/48×4 T; 48×2 T/48×4 T; 48×2 T/48×4 T
文库定量	Qubit定量	1×dsDNA HS Assay Kit for Qubit®	12642ES60/ES76	100 T/500 T
		dsDNA HS Assay Kit for Qubit®	12640ES60/ES76	100 T/500 T
	qPCR定量	Hieff NGS® Library Quantification Kit for Illumina®, qPCR Master Mix	12302ES05	500 T
		Hieff NGS® Library Quantification Kit for Illumina®, DNA Standard 1-6	12307ES09	6×96 μL
磁珠	DNA纯化	Hieff NGS® DNA Selection Beads	12601ES03/ES08/ES56/ES75	1 mL/5 mL/60 mL/450 mL
	RNA纯化	Hieff NGS® RNA Cleaner	12602ES03/ES08/ES56/ES75	1 mL/5 mL/60 mL/450 mL