外泌体是什么？外泌体(Exosome)研究正确打开方式
外泌体曾经被认为是细胞卸载废物的一种方式，在过去的十年中，我们对外泌体的看法发生了巨大变化。我们已经开始认识到，外泌体是从细胞中释放出来的，通过其RNA，蛋白质，脂质和DNA的载体充当信号载体和组织重塑者。参与癌症，炎症，免疫，中枢神经系统功能，心脏细胞功能。
外泌体在这些基本生物过程中的作用，它们作为生物标志物，也可作为靶向递送生物分子药物载体（如治疗）的工具研究。获取和研究外泌体所需的一切，从分离和鉴定分析以及染色等。基于qPCR的外泌体miRNA分析还是RNA-Seq方法，我们都有高质量的外泌体研究产品来支持您的科学研究并推进您的工作。
外泌体是什么
外泌体(Exosome)是由细胞内多泡体与细胞膜合后，释放到细胞外的一种直径约30-150nm的膜性囊泡，区别于微囊泡（100-1000nm),凋亡小体（400-4000nm）。
目前学术界主流观点认为外泌体的产生过程为:组物膜内陷形成内体(endosome)。再形成多囊泡体(mutivesicutar bodesMVB)，最后分泌到细胞外成为外泌体。
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性质分类 |
外泌体Exosomes |
微囊泡 Microvesicles |
凋亡小体Apoptotic Bodies |
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直径 |
30-150nm |
100-1000nm |
400-4000nm |
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密度(g/mL) |
1.10-1.18 |
1.02-1.22 |
1.16-1.28 |
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蛋白标记物 |
Alix、TSG101、HSC70、 CD63、CD81、CD9 |
Selectin、integrins、 CD40、MMP |
Histones |
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来源 |
细胞内的多泡小体与细胞膜融合后，其内的小泡释放到细胞外 |
细胞膜出芽形成 |
凋亡时细胞膜皱缩内 陷，分割包裹胞质形 成的泡状小体 |
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携带遗传信息 |
mRNA、miRNA、DNA |
mRNA、miRNA、DNA |
mRNA、miRNA、DNA |
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功能 |
胞内信息传递，胞外物质交换 |
胞内信息传递，胞间遗传物质运输 |
调理病理学及生理发生过程 |
外泌体发现历程
外泌体的功能
细胞增值与凋亡调控，转移与侵袭，血管生成，免疫应答，细胞分化，代谢调控，微生物组调控，病毒感染。
外泌体研究应用
1、载体药物研究：外泌体可作为载体将包裹在内的药物运送到目标区域，做到靶向治疗；
2、诊断研究：主要研究外泌体的种类、数目、大小和内容物与疾病之间的关系；来预测疾 病的发生与进展（如阿尔茨海默病）；
3、间充质干细胞外泌体改造：间充质干细胞来源外泌体与间充质干细胞有着相似的功能， 间充质干细胞来源外泌体更稳定，更好保存，易于管理和控制，可以人为改变其内容物 的种类和数量。
4、外泌体biomarker:外泌体内容物分析转录组测序、芯片（mRNA,LncRNA,miRNA,cir RNA)、蛋白质组、代谢组分析。
外泌体提取方法
翌圣生物经过研发，开发出独特的分离技术，可以快速从各种样本中如血浆/血清，细胞培养上清，尿液，乳液，腹水，羊水，唾液等其他体液中获得大量完整的外泌体，适用于下游共培养，电镜分析和高通量测序等实验。
外泌体的科研思路
对外泌体进行提取以后，通常对外泌体进行鉴定，方法为：NTA粒径分析、电镜扫描和Western Blot，WB中的常见指标有CD9, CD63, CD81、TSG101，后续科研思路比较广泛，其中外泌体内含RNA表达谱研究二代测序的研究是热门的科学研究方向，下图为常见的科研思路的整理图：
外泌体的鉴定
外泌体形成和释放后，会形成自身特有的标志性蛋白，利用Western blot对这些标志蛋白进行检测，可以对外泌体进行鉴定。翌圣外泌体鉴定试剂盒针对外泌体标志蛋白CD63和TSG101开发，适用于人、大鼠、小鼠外泌体的鉴定。
实验方法：
SDS-PAGE胶：10%分离胶；
样品上样量：10μg；
一抗：Anti-CD63抗体，1:2000稀释；Anti-TSG101抗体，1:1000稀释；4℃孵育过夜；
二抗：Anti-mouse IgG，arigo ARG65350，1:10000稀释，室温孵育50min；
曝光时间：5s。
外泌体高通量测序
外泌体参与多种生理或病理过程，如抗原呈递、RNA转运、组织修复、神经退行性疾病、肿瘤转移、代谢重建等。外泌体中含有细胞特异核酸和蛋白可以作为疾病的早期分子诊断标志物，通过对外泌体内RNA的测序分析进行疾病鉴定和外泌体功能分析。翌圣生物建库试剂盒，适合外泌体RNA高通量测序，低样本高收获。
可靠的低样本量RNA建库质量
图1:不同DV200 Human FFPE RNA的500ng投入量建库，Hieff NGS® Ultima Dual-mode RNA Library Prep Kit for Illumina® 相比于竞品N* ，文库大小一致，1st cDNA 合成效率更高。
图2：Hieff NGS® Ultima Dual-mode RNA Library Prep Kit for Illumina®相比于竞品N*，数据产出相关性高，数据均一性更好。
