随着干细胞治疗和基于类器官药物开发的技术推进,基质胶作为干细胞培养和类器官、3D细胞培养的营养和支持载体,在其中发挥着举足轻重的作用,其它应用包括血管生成、体内成瘤实验等。基质胶是从富含胞外基质蛋白EHS小鼠肿瘤中提取取的可溶性基底膜制备物,其主要成分由层粘连蛋白,Ⅳ型胶原,巢蛋白等组成,还包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多种生长因子。在室温条件下,基质胶聚合形成具有生物学活性的三维基质,能模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能,有利于体外细胞的培养和分化。
翌圣生物开发生产的CeturegelTM基质胶不含LDEV(乳酸脱氢酶增高病毒),超低内毒素含量,并全部经过支原体检测保证无支原体污染,包括基本浓度、高浓度、低生长因子等不同类型。
安全性高:不含LDEV(乳酸脱氢酶增高病毒)
浓度多样性:浓度范围在8~20 mg/ml之间
批次稳定性好:严格生产质检过程保证批次间性能稳定
低内毒素:内毒素含量≤4 EU/ml
污染物检测: 经检测无支原体和细菌、真菌残留
单批产量高:单批产量在L级别以上
兼容性好:可与任何类型的细胞培养基兼容
迁移侵袭实验
在Transwell上室加入稀释后CeturegelTM基质胶,铺上细胞并置于37℃、5%CO2培养箱内孵育24h后,4%多聚甲醛中固定后用含0.1%的结晶紫染液染色,在倒置相差显微镜下观察并计数细胞。
图1.细胞侵袭后经结晶紫染色的结果
3D细胞培养
将CeturegelTM基质胶与调整好浓度的单细胞HepG2悬液1:1轻轻混匀,用预冷的移液枪头按50μl上述混匀单细胞悬液加入预冷24孔板中,使其形成拱型细胞液滴,于37℃、5%CO2培养箱培养,每天观察并拍照记录。
图2.3D细胞培养结果
表1:3D细胞培养基质胶使用参考
培养板(皿)类型 |
细胞培养面积(cm2) |
推荐量(浓度≥3 mg/mL)* |
6孔板 |
9.6 |
200 μL/cm2 |
12孔板 |
4.5 |
180 μL/cm2 |
24孔板 |
2 |
180 μL/cm2 |
96孔板 |
0.32 |
160 μL/cm2 |
35mm培养皿 |
11.78 |
200 μL/cm2 |
100mm培养皿 |
58.95 |
200 μL/cm2 |
注:不同批次基质胶有一定的浓度差异,推荐用量仅供参考。
类器官培养
图3.类器官操作流程
01 拿到的基质有色差的变化(淡黄色到深红色)是什么原因?
对于含酚红的基质胶主要原因是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的,但是与5%CO2平衡后色差即会减少。冻融后,轻轻摇晃试剂瓶使基质胶分散均匀。
02 基质胶的操作要注意哪些事项?
所有操作需在无菌环境下进行,应使用预冷的移液器以保证基质胶呈匀浆状。
03 基质胶的如何分装冻存使用?
可将冻融后的CeturegelTMMatrix LDEV-Free基质胶分装在多个小管,所有分装均需用预冷的冻存管,迅速冷冻并保存,避免多次冻融。所有涉及到使用的物品在使用前需预冷,使用预冷的移液管、吸头及小管等操作基质胶。
类型 |
货号 |
产品名称 |
对标康宁 |
应用方向 |
即用型 3-6 mg/ml |
Ceturegel® Matrix Ready-to-use,LDEV-Free基质胶 |
/ |
适应于细胞培养、贴壁、侵袭和迁移实验以及细胞分化等研究 |
|
基本浓度 8-12 mg/ml |
Ceturegel® Matrix LDEV-Free基质胶 |
356234/354234 |
适应于2D和3D培养、侵袭和迁移实验,也可以用于体内成瘤实验 |
|
Ceturegel® Matrix Phenol Red-Free,LDEV-Free 基质胶 |
356237 |
主要应用于需要颜色检测如荧光检测实验等 |
||
高浓度 ≥18mg/ml |
Ceturegel® Matrix High Concentration,LDEV-Free 基质胶 |
354248 |
主要应用于如血管生成、凝胶栓塞和体内成瘤实验(对于血管生成建议基质胶终浓度要≥10mg/ml) |
|
Ceturegel® Matrix High Concentration,GFR,LDEV-Free 基质胶 |
354263 |
|||
Ceturegel® Matrix High Concentration,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基质胶 |
354262 |
|||
低生长因子 |
Ceturegel® Matrix GFR,LDEV-Free 基质胶 |
354230 |
主要是排除生长因子对实验的干扰。应用于与生长因子、信号通路等相关研究。无酚红的也用来做类器官培养 |
|
Ceturegel® Matrix GFR,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基质胶 |
356231 |
|||
干细胞用 |
Ceturegel® Matrix hESC-Qualified,LDEV-Free 基质胶 |
354277 |
主要用于如hESC,iPSC等干细胞培养 |
|
类器官用 |
Ceturegel® Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基质胶 |
356255 |
类器官培养专用基质胶 |
|
鼠尾胶原 |
Collagen, Type I , from rat tail 鼠尾胶原蛋白I(大鼠源) |
354236/354249 |
侵袭和迁移。培养或分化研究 |
|
Cebrary® Collagen, Type I , from mouse tail 鼠尾胶原蛋白I型(小鼠源) |
|
侵袭和迁移。培养或分化研究 |
点击上方蓝字产品名称,查看详情