关注！十月mRNA最新研究进展
疫情的持续凸显了疫苗的重要性，mRNA以极高的保护率成为所有疫苗种类中热度最高的C位选择。mRNA疫苗的应用场景不限于传染病预防，在治疗肿瘤、免疫疾病等领域都有令人期待的发展空间。mRNA的核心竞争力主要来源于序列设计和递送系统，关于mRNA疫苗的最新研究技术，十月份又有不少新的进展。
研究进展
图1. 论文截图（源于网络）
10月31日，哈佛大学威斯生物启发工程研究所的研究员埃文·赵(Evan Zhao)和麻省理工学院(MIT)的博士后、威斯研究所的技术研究员安吉洛·毛(Angelo Mao)在Nature Biotechnology发表文献[3]，研究人员找到了一种只在“读取”细胞内特定RNA序列后才能生产转基因基因的方法，从而开发出一种可以微调基因疗法的技术，应用范围从再生医学到癌症治疗。
产业化进展
mRNA疫苗开发流程包括病原体识别、测序、mRNA体外合成、修饰、纯化等操作。mRNA疫苗的研究制备需要多种原料来保证疫苗的成功开发，翌圣生物作为国内分子酶产业创新领导者，通过分子酶双向技术平台、大规模蛋白发酵纯化技术平台，目前已成功开发各类分子酶相关原料的产品。翌圣生物提供mRNA疫苗研究所需GMP级别原料并获得广大用户的认可。
mRNA体外转录
mRNA疫苗的生产主要是通过体外转录（IVT）其过程主要是以DNA为模板，加上对应的底物和缓冲液通过体外转录得到。翌圣生物提供GMP级UCF.ME® T7 RNA Polymerase 和高性价比的Hifair® T7 High Yield RNA Synthesis Kit高产量体外合成试剂盒，包含一整套RNA合成所需试剂。
产品特点
• 高产量：2 h内产生200-250 µg，单次放大反应可产生毫克级RNA
• 高灵活性：可获得无标记、标记以及加帽的RNA
• 通用性强：对于不同长度模板均表现出强大RNA合成能力
• 品质稳定：安捷伦2100测试纯度高、批间差异小
测试数据
短片段：2-4h可有效转录
长片段：1-2h可有效转录
▲ 不同目的片段的转录产量
▲ 不同目的片段的转录品质测定
Pyrophosphatase,Inorganic
UCF.ME® Pyrophosphatase, Inorganic GMP-grade是大肠杆菌重组来源，严格按照GMP工艺要求生产，无病原体残留和宿主残留，避免杂质引起的不良反应、过敏反应，确保产品安全性。
未加入无机焦磷酸酶组
IPPA组
▲ 投入200ng模板量，RNA纯化后稀释20倍检测产量，与空白相比，RNA产量可大幅度提高
mRNA加帽修饰
• GMP级:严格执行ISO13485质量管理规范，原料可追溯、可复制
• 无残留:无核酸酶、切口酶残留，内毒素含量低
• 纯度高:纯度 ≥95%（SDS-PAGE）
• 酶活力高:微量即可加帽
从上至下依次为：裸露RNA、Cap0 RNA、Cap1 RNA
调整酶量以及SAM的使用量，加帽可达100%
mRNA残留去除
• GMP级:严格执行ISO13485质量管理规范，原料可追溯、可复制
• 高纯度:纯度≥95%（SDS-PAGE）
• 无残留:无RNase，内毒素含量低
C为不加DNaseI 的对照组，进行转录模板去除实验，Yeasen能很好的去除RNA中的DNA残留
用于RNA建库，与进口品牌T相比，性能相当
mRNA纯化
•高效率:mRNA纯化在45min内完成
•高纯度:Oligo(dT) 磁珠特异性吸附mRNA
•灵活:兼容手动和自动化操作平台
•可靠:获得的mRNA适用NGS、体外翻译、RT-PCR和cDNA合成
▲ mRNA Isolation Kit纯化不同RNA样本中的mRNA 管家基因产量表征mRNA回收效果。rRNA相关基因产量表征rRNA去除效果
相关产品
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产品名称 |
货号 |
规格 |
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10614ES84/92 |
2000/10000U |
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10612ES84/92 |
2000/10000U |
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10613ES92/97 |
10/50KU |
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10621ES10/20 |
10/20 KU |
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10620ES10/60 |
10/100U |
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10611ES76/84 |
500/2000U |
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10623ES50/60 |
50/100T |
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10619ES02 |
0.5ml |
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10132ES03 |
1ml |
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10133ES03 |
1 Set (4 vial) |
参考文献>>
[1] Lokugamage MP, Vanover D, Beyersdorf J, et al. Optimization of lipid nanoparticles for the delivery of nebulized therapeutic mRNA to the lungs. Nature biomedical engineering 2021;5(9):1059-1068.
