——提取效果媲美进口M*品牌

PART 01

背景简介

 

20世纪80年代中期前，微生物学家通过人工培养的方法研究土壤微生物生态系统，而可培养的微生物不到总数的1%，相当多的微生物还未被认知。随着宏基因组学的快速发展，通过提取土壤微生物总DNA来研究生态系统的方法开始出现。

然而，土壤主体是矿物质和腐殖质组成的固体土粒，约占土壤体积的 50%，均为土壤核酸提取中的重要干扰物质，矿物质会影响微生物的破壁，腐殖质会抑制下游扩增等研究。随着高通量测序技术的不断发展，针对土壤微生物的研究也日益受到越来越多研究者的关注。

为了解决这些难题，翌圣研发了一款土壤DNA提取试剂盒—MolPure^® Soil DNA Kit，能高效获得土壤DNA，有利于实现后续对土壤微生物生态系统多样性的研究。

PART 02

产品介绍

MolPure^® Soil DNA Kit采用陶瓷珠和二氧化硅颗粒混合而成的玻璃珠进行样本处理，可有效处理真细菌孢子和内生孢子，革兰氏阳性细菌，酵母，藻类，线虫和真菌等土壤中的各类微生物。该试剂盒的离心吸附柱中采用的硅基质材料为特有新型材料，配合独特的裂解液配方可快速回收高纯度核酸。提取的DNA纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种下游应用实验，如酶切、PCR等实验。

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产品特点

操作便捷：室温操作，仅需40min即可回收DNA。

产量高：独特的玻璃珠能高效裂解土壤微生物，释放更多DNA，最大限度地提取其产量。

适用范围广：适合花坛土、花盆土、农田土、山林土、淤泥、黑土等各类型土壤。

纯度高：有效去除土壤中腐殖酸、重金属离子等杂质，并与离心柱法纯化相结合，大大地提高了DNA的纯度。

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操作流程

 

图1 土壤DNA提取操作流程图

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产品优势

提取效果媲美进口M*品牌

 

图2 琼脂糖电泳检测大肠杆菌16s rDNA的扩增条带。Y为翌圣品牌，M*为进口品牌，阳性对照为培养的大肠杆菌gDNA，Y1/Y2和M1/M2为1μL洗脱液，M3/M4为M1/M2稀释3倍后的洗脱液。

比进口O*品牌操作简单，节约30min

 

图3  Yeasen土壤DNA提取试剂盒和O*品牌同类型产品操作步骤对比图。Yeasen土壤DNA提取试剂盒比O*品牌同类型产品步骤省3步，并且提取速度节约30min。

 

PART 03

F A Q

 

Q:

试剂盒是如何进行破壁的？

MolPure^® Soil DNA Kit采用独特的裂解液和珠磨法进行破壁，可有效处理真细菌孢子和内生孢子，革兰氏阳性细菌，酵母，藻类，线虫和真菌等土壤中的各类微生物。

Q:

如何解决DNA电泳拖尾严重呢？

1、可能原因一：土壤中含有丰富小型生物和易裂解的细菌。这些易裂解的小型生物和细菌在玻璃珠长时间涡旋中会造成DNA降解。

解决方案：可通过减少涡旋时间，或者用高能量的珠磨仪代替手工涡旋。高能量的珠磨仪能提供非常高的能量，在短时间就可以达到破壁效果，能减少DNA的降解。

2、可能原因二：样品中存在某些化学物质，或者样品在贮藏过程中发生降解。

解决方案：针对不同的样品，采用合适的贮藏条件进行保存，以防止微生物DNA的降解。

 

Q:

该方法可以获得所有微生物的DNA吗？

不一定。土壤样品中含有大量的微生物，有细菌和真菌，以及其他植物根系，小型生物。某些真菌，特别孢子类真菌，因带有非常厚的细胞壁，无法破壁而导致DNA的丢失。因此，可加强破壁的强度和时间来提取这些难提取的DNA。

Q:

哪些因素会影响DNA的产量呢？

土壤样品中所含的微生物的种类，微生物的数量，以及土壤样品中的有机，无机盐都会直接影响到DNA的产量。

Q:

哪些事项需要注意？

注意事项如下：

1）土壤DNA产量主要来源样品内微生物、植物动物残渣，冰冻或贮存过程中DNA会发生不同程度的降解，导致DNA含量降低或条带成较严重的涂抹状（即降解）。因此，尽量使用新鲜样品或贮存时间较短样品进行DNA提取。

2）如果土壤样品中的水分含量比较多，建议先将水分离心去除后再进行提取。

3）不要省略空柱子离心步骤，该步骤能除去柱子中残留的乙醇，否则可能会影响下游实验；如产物点电泳时无法正常沉降，绝大部分情况下由于空甩不完全，乙醇残留所致，可在下次提取中，提高离心机速度或延长空甩时间至5~10min，可解决残留问题。

 

PART 04

订购信息

 

产品名称	产品编码	规格
MolPure® Soil DNA Kit 土壤DNA提取试剂盒	18815ES50	50T