Hifair®系列逆转录酶
——助力您合成高质量cDNA
Hifair®系列逆转录酶是在M-MLV Reverse Transcriptase基础上改造的逆转录酶，其热稳定性大幅度提高，可耐受60℃的反应温度，适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时， Hifair®系列逆转录酶缺失了RNaseH活性，提高了其延伸能力，最长可合成19.8 kb的cDNA。此外，该酶增强了与模板的亲和力，非常适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。
产品选择指南
|
产品形式 |
产品名称 |
引物 |
适用实验类型 |
产品特点 |
|
单酶 |
无 |
PCR/qPCR |
A. 逆转录条件：42℃,30 min |
|
|
B. 逆转录条件：55℃,15 min 总RNA使用范围：10 pg-5 μg 合成cDNA长度：19.8 kb |
||||
|
酶和buffer 分开 |
单独成管的 |
PCR/qPCR
|
同A |
|
|
同B |
||||
|
酶和buffer预混 |
Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR/11120ES/11123ES |
按比例预混的 |
qPCR |
C. 逆转录条件：42℃,30 min 总RNA使用范围：1 ng-5 μg 2×预混液 |
|
Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR/11141ES |
D. 逆转录条件：55℃,15 min 总RNA使用范围：10 pg-5 μg 4×预混液，可投入更大体积模板 |
产品性能
可耐受60℃反应温度，适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录
图1. 以500 ng 293T细胞的总RNA为模板, 使用11139ES在42℃-65℃下进行逆转录。取1 μL cDNA为模板, 使用Hieff® Canace Gold 高保真酶 (Cat NO.10148ES)扩增TFRC基因（4.4 kb）。M:1 kb DNA ladder.
优越的延伸性能，可合成19.8 kb的cDNA
图2. 以500 ng 293T细胞的总RNA为模板，oligodT为引物，使用11139ES合成cDNA。 取1 μL cDNA为模板，使用Hieff® Canace Gold 高保真酶(Cat NO.10148ES)扩增DY1C1N1基因（19.9 kb）的5’的500 bp。M: 1 kb DNA ladder.
出色的逆转录效率，适合不同 GC 含量、不同表达丰度的基因
图3. 以300 ng 293T细胞的总RNA为模板, 使用11141ES、T品牌合成cDNA。取1 μL cDNA为模板, 使用Hieff UNICON® Power qPCR 预混液 (Cat
NO.11195ES)扩增20个不同GC含量（25-65%）、不同表达丰度的基因。
线性检测范围广，Total RNA 10 pg-5 μg
图4. 以10 pg-5 μg的293T细胞的总RNA为模板，使用11141ES合成cDNA。取1 μL cDNA为模板，使用Hieff UNICON® Power qPCR 预混液 (Cat NO.11195ES)扩增PTTG1基因。
相关产品
|
产品定位 |
产品名称 |
货号 |
|
单酶 |
11110ES92/93 |
|
|
高灵敏度单酶 |
11111ES92/93 |
|
|
Kit |
11119ES60 |
|
|
Kit(含gDNA去除步骤) |
Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus) |
11121ES60 |
|
高灵敏Kit（含gDNA去除步骤） |
Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus) |
11139ES60 |
|
预混液 |
11120ES60 |
|
|
预混液（含gDNA去除步骤） |
Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) |
11123ES60 |
|
高灵敏预混液（含gDNA去除步骤） |
Hifair® III1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) |
11141ES60 |
YEASEN逆转录产品已发表文献（部分）
[1] Liu C X, Li X, Nan F, et al. Structure and degradation of circular RNAs regulate PKR activation in innate immunity[J]. Cell, 2019, 177(4): 865-880. e21.（IF31.398）
[2] Fan H, Hong B, Luo Y, et al. The effect of whey protein on viral infection and replication of SARS-CoV-2 and pangolin coronavirus in vitro[J]. Signal transduction and targeted therapy, 2020, 5(1): 1-3. (IF13.493)
[3] Wang J., et al., The mycobacterial phosphatase PtpA regulates the expression of host genes and promotes cell proliferation[J]. Nat Commun. 2017 Aug 15;8(1):244.（IF 12.353）
[4] Zhou L, Hou B, Wang D, et al. Engineering Polymeric Prodrug Nanoplatform for Vaccinatio Immunotherapy of Cancer[J]. Nano Letters, 2020.（IF12.279）
[5] Xu L, Xu S, Sun L, et al. Synergistic action of the gut microbiota in environmental RNA interference in a leaf beetle[J]. Microbiome, 2021, 9(1). (IF 11.607)
HB210926
