一、背景介绍
生物体内 Total RNA中rRNA占比高,但是可以提供的有效信息少,这些RNA会产生大量的没有价值的数据,对于获取生物信息研究意义不大,同时,占比较高的rRNA,使得mRNA在转录本中相对丰度低,从而影响低丰度的转录本的检测。因而在常规的RNA 测序(RNA-seq)中,rRNA的有效去除对于实现RNA经济高效的测序至关重要。
二、产品描述
(一)MaxUp 系列rRNA去除试剂
MaxUp 系列rRNA去除试剂基于RNase H消化法去除样本总RNA(Total RNA)中的核糖体RNA(rRNA),以保留信使RNA(mRNA)和其它非编码RNA。针对的样本类型丰富,起始量范围广泛,全流程仅需不到2h,手工操作的时间少于10min。同时针对常规样本和低质量样本(如FFPE类)均可对rRNA高效去除,显著提高测序数据中有效数据信息,实现RNA样本的经济高效测序。
(二)MaxUp系列rRNA去除流程
目前rRNA的去除方式以RNA酶消法为主 ,特别对于部分RNA降解样本(如FFPE样本)RNA酶消法更能展现其优势。
图1. MaxUp系列rRNA去除原理示意图
三、性能展示
(一) 植物样本
利用RNase H消化去除植物来源总RNA中的核糖体RNA,利用qPCR对比去除前后rRNA基因和mRNA基因的表达量变化:结果表明本产品能对植物中rRNA高效去除。
图2.以1μg 拟南芥叶片 RNA进行rRNA去除,qPCR对比去除前后rRNA基因和mRNA基因的表达量变化
(二) 人/大鼠/小鼠类样本
利用RNase H消化去除植物来源总RNA中的核糖体RNA,建库后送测序,数据分析显示本产品针对该类样本中rRNA可高效去除。
图3.分别以1μg人、小鼠、大鼠总RNA为样本, rRNA去除后建库测序分析rRNA残留
(三) 低质量RNA样本(如FFPE RNA)
低质量样本中往往ITS/ETS序列比例残留较多(参考下图FFPE RNA: DV200=20%),而这部分序列同样也会产生较多的无效数据,所以在低质量样本中通过新增ITS/ETS探针,可进一步有效富集目标序列。本产品中除了针对常规的45S Pre-rRNA的探针之外,还增加了Human 45S ITS/ETS区域的探针设计,在不影响常规样本中rRNA去除效果的基础上,确保对于低质量样本中的rRNA也能够更加高效的去除 。
图4. 增加ITS/ETS探针前后,rRNA残留以及ITS/ETS残留情况数据对比
四、订购信息
类型 |
名称 |
货号 |
规格 |
rRNA去除 |
12254ES08/24 |
8/24T |
|
12257ES08/24/96 |
8/24/96T |
HB210129