细胞凋亡是细胞的一种基本生物学现象，是指在一定的生理或者病理条件下，细胞主动的、高度有序的、自己结束其生命的过程。它在生物体的进化、内环境的稳定以及多个系统的发育中起着重要的作用。凋亡过程中伴随着细胞膜、蛋白、DNA等各种变化，可通过各种手段检测，具体介绍如下图所示：

图1. 细胞凋亡历程

目前市场上出现多种细胞凋亡周期检测试剂盒，国外品牌仍占据着该领域的半壁江山，但价格昂贵、规格小、物流慢，一定程度上限制科研进程。为了打破这种局面，在国家大力扶持自主品牌的政策下，多家企业投入研究，研发出大量价格低廉、性质稳定的细胞凋亡周期检测产品，提高了相关科研、检测实验室的效率，降低相应成本。

翌圣生物科技(上海)股份有限公司就是凋亡检测试剂盒生产厂家之一。不仅长期生产多种高效稳定、价格低廉、适用范围广的凋亡检测试剂盒，且整理出一整套完美检测细胞凋亡的方法，实现了细胞从凋亡早期到晚期的实时监测。下面，就让我们从问题出发，解读细胞凋亡的全过程。

 

如何检测早期凋亡？

在细胞凋亡早期阶段，细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸（PS）从胞质转至胞外，暴露在细胞外环境中，细胞膜通透性增加，从而被PS特异的Annexin-V探针标记。目前YEASEN公司提供的Annexin-V细胞凋亡检测试剂盒，可适用于早期凋亡检测。Annexin-V为Ca²⁺依赖性磷脂结合蛋白，对PS有极强的结合力。另外，本试剂盒中还提供了PI/7-AAD进行双染色，由于正常细胞不会被染色，凋亡早期细胞可被标记上Annexin-V，坏死或凋亡晚期细胞被PI/7-AAD染色，因此各阶段的细胞明显区分开来。

图2. Annexin-V实验原理

 

 

 

性能展示

 

 

1.不同荧光基团标记Annexin-V探针，可实现多重染色

包括PE、FITC、Alexa Fluor 488等标记Annexin-V，靶向细胞外翻的PS，在不同的激发和发射通道下，发出绿色、红色不同颜色的荧光信号，可与细胞核等探针联合使用，实现细胞多重染色。

图3a. Annexin-V-Fluor647 (红色)染色细胞，来源：参考文献

图3b. Annexin-V-FITC (绿色)染色细胞，来源：参考文献

2.Annexin-V探针灵敏度高、特异性强

纳摩尔浓度水平、可高选择性地识别和标记凋亡早期外翻的PS，不会标记其他DNA、RNA，检测出极少量的凋亡细胞。

3.背景干扰少、稳定性强

不会出现其他荧光颜色背景，染色清晰；且批次间性能稳定。

4.翌圣Annexin-V探针与进口产品比较，价格低廉

相同规格条件，比较翌圣与T*进口Annexin-V探针价格差异。

图4. YEASEN和T*进口的Annexin-FITC产品价格对比图（规格：50 T）

除此之外，细胞凋亡早期，线粒体跨膜电位的下降，导致膜穿透性改变。JC-1染料可以检测线粒体跨膜电位的变化，正常线粒体内，JC-1发出强烈的红色荧光。凋亡早期的线粒体内，由于膜电位的下降或丧失，JC-1产生绿色荧光。通过其荧光的增强或减弱可反应线粒体内膜电负性的增高或降低。
 

如何检测晚期凋亡？

细胞凋亡晚期，染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将荧光素/酶标记的dUTP结合到DNA的3'-末端，从而可进行凋亡细胞的检测，这类方法就是TUNEL法。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。目前YEASEN公司提供的TUNEL细胞凋亡检测试剂盒，可适用于晚期凋亡检测。

 

图5. TUNEL实验原理
 

 

 

性能展示

 

 

1.TUNEL探针可检测石蜡包埋组织切片、冰冻组织切片、培养的细胞和从组织中分离的细胞不同样本

不同荧光颜色TUNEL试剂盒，可标记细胞、爬片、石蜡切片等不同样本，发射不同荧光信号。

图6a. TUNEL-FITC检测细胞样本,来源：参考文献

 

图6b. TUNEL-Alex488检测石蜡切片,来源：参考文献

图6c. TUNEL-Alex640检测细胞爬片,来源：参考文献

2.靶向特定的凋亡晚期中的DNA，具有高选择性和高灵敏度

纳摩尔浓度水平的TUNEL探针，高选择性地靶向和标记晚期凋亡细胞的片段化DNA的粘性3'-OH末端，发出强烈荧光信号，可检测出极少量的凋亡细胞。

3.检测多样性

流式细胞仪、荧光显微镜、共聚焦、酶标仪等仪器均可以检测荧光信号。

图7. 不同仪器检测TUNEL荧光信号值

4.背景干扰少、稳定性强

不会出现其他荧光颜色背景，染色清晰；且批次间性能稳定。

5.翌圣TUNEL探针与进口产品比较，价格低廉

相同规格条件，比较翌圣与T*进口TUNEL-FITC探针价格差异。

图8. YEASEN和T*进口的TUNEL-FITC产品价格对比图（规格：50 T）

 

产品选择指南

目前翌圣拥有10余种早期凋亡和晚期凋亡检测试剂盒，各具特色，能够完全满足用户各种需求。

 

 

订购信息

 

产品名称	产品货号	规格	价格（元）	促销价（元）
Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit	40302ES/20/50/60	20/50/100 T	480.00/ 960.00/1680.00	366.00 /686.00 /986.00
Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit	40310ES20/50/60	20/50/100 T	480.00/960.00/1680.00	386.00/786.00 /1346.00
JC-1线粒体膜电位检测试剂盒 JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit	40706ES60	100 T	800.00	/
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒（FITC） TUNEL Apoptosis Detection Kit (FITC)	40306ES20/50/60	20/50/100 T	1178.00/2680.00/4080.00	/

HB20200409