背景介绍
蛋白质种类很多,在理化特性方面差异较大,因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。动物蛋白提取一般遵循如下原则:尽可能提高蛋白的溶解度,抽提最大量的总蛋白,减少蛋白质的损失;减少对蛋白质的人为修饰;破坏蛋白与其他生物大分子的相互作用,并使蛋白质处于完全变性状态。
产品信息
1、裂解液形式:
RIPA裂解液(Radio Immunoprecipitation Assay Lysis buffer,放射免疫沉淀法裂解缓冲液)是一种传统的可用于裂解细胞或组织的快速裂解液,其原理为利用表面活性剂等裂解细胞膜(包括核膜),从组织或动物细胞中抽取可溶性蛋白。RIPA裂解液裂解后得到的蛋白一般可直接用于常规的WB、IP、co-IP等实验。
货号 |
名称 |
主要用途 |
有效裂解成分 |
裂解强度 |
提取膜 蛋白 |
提取胞浆 蛋白 |
提取核 蛋白 |
含蛋白酶 抑制剂 |
含磷酸酶 抑制剂 |
RIPA裂解液(强) |
WB/IP |
1% Triton X-100, 1% Sodium Deoxycholate, 0.1% SDS |
强 |
很好 |
很好 |
很好 |
是 |
是 |
|
RIPA裂解液(弱) |
WB/IP/Co-IP |
1% NP-40, 0.25% Sodium Deoxycholate |
温和 |
一般 |
很好 |
较好 |
是 |
是 |
|
RIPA裂解液(中) |
WB/IP |
1% NP-40, 0.5% Sodium Deoxycholate, 0.1% SDS |
中 |
较好 |
很好 |
较好 |
是 |
是 |
|
免疫印迹及 免疫沉淀用 (WB/IP)裂解液 |
WB/IP/Co-IP |
1% Triton X-100 |
温和 |
一般 |
很好 |
较好 |
是 |
是 |
|
免疫印迹及 免疫沉淀用 (WB/IP) 裂解液(无抑制剂) |
WB/IP/Co-IP |
1% Triton X-100 |
温和 |
一般 |
很好 |
较好 |
否 |
否 |
|
RIPA裂解液 (强,无抑制剂) |
WB/IP |
1% Triton X-100, 1% Sodium Deoxycholate, 0.1% SDS |
强 |
很好 |
很好 |
很好 |
否 |
否 |
|
植物蛋白 提取试剂盒 |
植物WB/IP |
1% Triton X-100, 1% Sodium Deoxycholate, 0.1% SDS |
强 |
很好 |
很好 |
很好 |
是 |
是 |
|
NP-40 (Nonidet P 40) |
WB/IP/Co-IP |
NP-40纯品, 可根据需要配置成1% 的NP-40裂解液, 裂解强度温和 |
一般 |
很好 |
较好 |
/ |
/ |
||
SDS |
WB |
SDS纯品, 可根据需要配置成1%的 SDS裂解液, 裂解强度强 |
很好 |
很好 |
很好 |
/ |
/ |
2、Kit形式:
蛋白提取实验是蛋白功能研究,客户可购买商品化的蛋白提取试剂盒。图1简单的介绍了不同部位蛋白提取所利用的提取试剂盒,并且需要注意以下事项:
(1)所要研究的样本种属----动物 、植物、细菌、真菌、昆虫、酵母等;
(2)蛋白获得的部位----总蛋白、膜蛋白、核蛋白、跨膜蛋白等;
(3)下游的实验---考虑提取得到蛋白的活性等;
图1. 细胞不同组织部位蛋白提取
产品特点
FAQ
1.如何选择合适的RIPA裂解液?
如果您只是要做普通的WB、IP或者co-IP,我们建议您使用免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液,该裂解液在裂解细胞或组织后一般不会形成粘滞的透明状DNA团块,不必采用超声处理就可进行下一步操作。同时,该裂解液还适用于磷酸化蛋白的WB检测。
如果使用免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液的效果不是很好,那您的蛋白可能比较特殊,我们建议您可以尝试另外几种裂解液。如果您的蛋白是难溶性的蛋白,建议您可以尝试使用裂解强度更高的裂解液,如RIPA裂解液(强/中);如果您在做IP实验的时候发现背景很高,即有很多非特异性蛋白被IP下来,这时候您需使用裂解强度较强的裂解液,比如RIPA裂解液(强/中)。反之,如果您发现目的蛋白无法IP下来,则说明您使用的裂解液强度过强,此时需使用裂解强度较弱的裂解液,比如RIPA裂解液(弱)。
2. RIPA裂解液可以获得细胞中的不同蛋白吗?
RIPA裂解液提取的是全蛋白,包括核蛋白、浆蛋白、膜蛋白等。如果要提取特定的蛋白(如:核蛋白、膜蛋白)则可利用专门提这类蛋白的试剂盒进行提取。
文献引用
[1] Yang Zhang, Zhixue Fang, Xiong Guo, et al. lncRNA B4GALT1‐AS1 promotes colon cancer cell stemness and migration by recruiting YAP to the nucleus and enhancing YAP transcriptional activity[J]. Journal of Cellular Physiology, 2019,234(10): 18524-18534.
20126ES50 和20101ES60 IF:4.522
[2] Li Z, Han S, Jia Y, et al. MCPIP1 regulates RORα expression to protect against liver injury induced by lipopolysaccharide via modulation of miR‐155[J]. Journal of cellular physiology, 2019, 234(9): 16562-16572.
20126ES50 IF:4.522
[3] Wang Q, li Wu Z, Yuan X, et al. Bilobetin induces kidney injury by influencing cGMP-mediated AQP-2 trafficking and podocyte cell cycle arrest[J]. Phytomedicine, 2019, 64: 153073.
20127ES50 IF:4.18
[4] Wang Y, Li X, Gong X, et al. MicroRNA-322 Regulates Self-renewal of Mouse Spermatogonial Stem Cells through Rassf8[J]. International journal of biological sciences, 2019, 15(4): 857.
RIPA IF: 4.067
[5] Liu X Y, Li D, Li T, et al. Effects of intranasal oxytocin on pup deprivation-evoked aberrant maternal behavior and hypogalactia in rat dams and the underlying mechanism[J]. Frontiers in neuroscience, 2019, 13: 122.
RIPA IF: 3.648
[6] Han S, Li Z, Han F, et al. ROR alpha protects against LPS-induced inflammation by down-regulating SIRT1/NF-kappa B pathway[J]. Archives of biochemistry and biophysics, 2019, 668: 1-8.
20126ES50 IF: 3.559
订购信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格(元) |
20101ES60 |
100 mL |
228 |
|
20114ES60 |
100 mL |
228 |
|
20115ES60 |
100 mL |
228 |
|
20118ES60 |
100 mL |
228 |
|
20126ES50/60 |
50 T/100T |
935/1545 |
|
20127ES50/60 |
50 T/100T |
835/1435 |
|
20128ES50/60 |
50 T/100T |
786/1365 |
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产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格(元) |
20123ES10/50 |
1瓶(10片)/1瓶(50片) |
533/2353 |
|
20124ES03/10/60 |
1 mL /10×1 mL /100×1 mL |
217/ 1587/ 9987 |
|
20109ES05/20/70 |
2 mL/10×2 mL/100×2 mL |
207/ 1597/ 11937 |
|
20104ES03/08 |
1 g/ 5×1 g |
113/453 |