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蛋白提取系列专题——多方位获取您所需要的样本蛋白

背景介绍
 

蛋白质种类很多,在理化特性方面差异较大,因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。物蛋白提取一般遵循如下原则:尽可能提高蛋白的溶解度,抽提最大量的总蛋白,减少蛋白质的损失;减少对蛋白质的人为修饰;破蛋白与其他生物大分子的相互作用,并使蛋白质处于完全变性状态
 

产品信息
 

1、裂解液形式:

RIPA裂解液(Radio Immunoprecipitation Assay Lysis buffer,放射免疫沉淀法裂解缓冲液)是一种传统的可用于裂解细胞或组织的快速裂解液,其原理为利用表面活性剂等裂解细胞膜(包括核膜),从组织或动物细胞中抽取可溶性蛋白。RIPA裂解液裂解后得到的蛋白一般可直接用于常规的WB、IP、co-IP等实验。

货号

名称

主要用途

有效裂解成分

裂解强度

提取膜

蛋白

提取胞浆

蛋白

提取核

蛋白

含蛋白酶

抑制剂

含磷酸酶

抑制剂

20101ES

RIPA裂解液(强)

WB/IP

1% Triton X-100,

1% Sodium

Deoxycholate,

0.1% SDS

很好

很好

很好

20114ES

RIPA裂解液(弱)

WB/IP/Co-IP

1% NP-40,

0.25% Sodium

Deoxycholate

温和

一般

很好

较好

20115ES

RIPA裂解液(中)

WB/IP

1% NP-40,

0.5% Sodium

Deoxycholate,

0.1% SDS

较好

很好

较好

20118ES

免疫印迹及

免疫沉淀用

WB/IP)裂解液

WB/IP/Co-IP

1% Triton X-100

温和

一般

很好

较好

20119ES

免疫印迹及

免疫沉淀用

WB/IP)

裂解液(无抑制剂)

WB/IP/Co-IP

1% Triton X-100

温和

一般

很好

较好

20120ES

RIPA裂解液

强,无抑制剂)

WB/IP

1% Triton X-100,

1% Sodium

Deoxycholate,

0.1% SDS

很好

很好

很好

20131ES

植物蛋白

提取试剂盒

植物WB/IP

1% Triton X-100,

1% Sodium

Deoxycholate,

0.1% SDS

很好

很好

很好

20103ES

NP-40

(Nonidet P 40)

WB/IP/Co-IP

NP-40纯品,

可根据需要配置成1%

的NP-40裂解液,

裂解强度温和

一般

很好

较好

/

/

20106ES

SDS

WB

SDS纯品,

可根据需要配置成1%的

SDS裂解液,

裂解强度强

很好

很好

很好

/

/

 

2、Kit形式:

蛋白提取实验是蛋白功能研究,客户购买商品化的蛋白提取试剂盒。1简单的介绍了不同部位蛋白提取所利用的提取试剂盒,并且需要注意以下事项:

1)所要研究的样本种属----动物 、植物、细菌、真菌、昆虫、酵母等;

2)蛋白获得的部位----总蛋白、膜蛋白、核蛋白、跨膜蛋白等;

3)下游的实验---考虑提取得到蛋白的活性等;

图片.png 

1. 细胞不同组织部位蛋白提取


产品特点
 

图片.png
 

FAQ

1.如何选择合适的RIPA裂解液?

如果您只是要做普通的WB、IP或者co-IP,我们建议您使用免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液,该裂解液在裂解细胞或组织后一般不会形成粘滞的透明状DNA团块,不必采用超声处理就可进行下一步操作。同时,该裂解液还适用于磷酸化蛋白的WB检测。

如果使用免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液的效果不是很好,那您的蛋白可能比较特殊,我们建议您可以尝试另外几种裂解液。如果您的蛋白是难溶性的蛋白,建议您可以尝试使用裂解强度更高的裂解液,如RIPA裂解液(强/中);如果您在做IP实验的时候发现背景很高,即有很多非特异性蛋白被IP下来,这时候您需使用裂解强度较强的裂解液,比如RIPA裂解液(强/中)。反之,如果您发现目的蛋白无法IP下来,则说明您使用的裂解液强度过强,此时需使用裂解强度较弱的裂解液,比如RIPA裂解液(弱)。

 

2. RIPA裂解液可以获得细胞中的不同蛋白吗? 

RIPA裂解液提取的是全蛋白,包括核蛋白、浆蛋白、膜蛋白等。如果要提取特定的蛋白(如:核蛋白、膜蛋白)则可利用专门提这类蛋白的试剂盒进行提取。


文献引用

[1] Yang Zhang, Zhixue Fang, Xiong Guo, et al. lncRNA B4GALT1‐AS1 promotes colon cancer cell stemness and migration by recruiting YAP to the nucleus and enhancing YAP transcriptional activity[J]. Journal of Cellular Physiology, 2019,234(10): 18524-18534.

20126ES50 20101ES60  IF:4.522

[2] Li Z, Han S, Jia Y, et al. MCPIP1 regulates RORα expression to protect against liver injury induced by lipopolysaccharide via modulation of miR‐155[J]. Journal of cellular physiology, 2019, 234(9): 16562-16572.   

20126ES50   IF:4.522

[3] Wang Q, li Wu Z, Yuan X, et al. Bilobetin induces kidney injury by influencing cGMP-mediated AQP-2 trafficking and podocyte cell cycle arrest[J]. Phytomedicine, 2019, 64: 153073.    

20127ES50   IF:4.18

[4] Wang Y, Li X, Gong X, et al. MicroRNA-322 Regulates Self-renewal of Mouse Spermatogonial Stem Cells through Rassf8[J]. International journal of biological sciences, 2019, 15(4): 857.   

RIPA   IF: 4.067

[5] Liu X Y, Li D, Li T, et al. Effects of intranasal oxytocin on pup deprivation-evoked aberrant maternal behavior and hypogalactia in rat dams and the underlying mechanism[J]. Frontiers in neuroscience, 2019, 13: 122.

RIPA   IF: 3.648

[6] Han S, Li Z, Han F, et al. ROR alpha protects against LPS-induced inflammation by down-regulating SIRT1/NF-kappa B pathway[J]. Archives of biochemistry and biophysics, 2019, 668: 1-8.  

20126ES50  IF: 3.559


订购信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

RIPA Lysis Buffer (Strong)

RIPA裂解液(强)

20101ES60

100 mL

228

RIPA Lysis Buffer (Weak)

RIPA裂解液(弱)

20114ES60

100 mL

228

RIPA Lysis Buffer (Medium)

RIPA裂解液(中)

20115ES60

100 mL

228

Lysis Buffer for WB/IP Assays

免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液

20118ES60

100 mL

228

细胞核/细胞浆蛋白抽提试剂盒

20126ES50/60

50 T/100T

935/1545

细胞膜/细胞浆蛋白抽提试剂盒

20127ES50/60

50 T/100T

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组织/细胞线粒体分离试剂盒

20128ES50/60

50 T/100T

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400-6111-883