核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,为生命的最基本物质之一。核酸广泛存在于所有动植物细胞、微生物内,并且常与蛋白质结合形成核蛋白。核酸提取是分子生物学实验中最基础的实验之一,几乎所有的分子生物学实验上游都需要用到核酸提取。
核酸提取方法简介
核酸提取包含裂解和纯化两大步骤,裂解是使样品中的核酸游离在裂解体系中的过程。通过使蛋白质变性,破坏膜结构及解开与核酸相连接的蛋白质,从而实现核酸游离在裂解体系中。裂解体系中还可能加入蛋白酶,利用蛋白酶将蛋白质消化成小的片段,促进核酸与蛋白质的分开,同时,也便于后面的纯化操作以及获得更纯的核酸。
表1. 核酸提取常见裂解方式
裂解方法 |
原理 |
应用 |
适用样本 |
CTAB法 |
一种阳离子去污剂,可溶解细胞膜,并与核酸形成复合物。该复合物在高盐溶液中可溶,通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。 |
DNA、RNA提取 |
植物组织、真菌等 |
SDS法 |
一种阴离子去污剂,可促使细胞裂解,使染色体离析、蛋白质变性,释放出核酸。 |
DNA提取、质粒提取 |
适用于大部分实验材料,如血液、细胞、动物组织、细菌、酵母等 |
胍盐法 |
胍盐是蛋白强变性剂,采用高浓度的胍盐裂解细胞,促使核蛋白体解离,同时使细胞内核酸酶失活,避免释放出的核酸被降解。 |
DNA、RNA提取 |
适用于各类动物组织、培养细胞、次生代谢物较少的植物组织 |
纯化则是使核酸与裂解体系中的其它成分,如蛋白质、盐及其它杂质彻底分离的过程。常见的纯化方式有:有机溶剂抽提、硅胶质吸附(柱式法)、磁珠吸附3种。第一种方法是利用有机溶剂对裂解体系进行反复抽提以去除蛋白等杂质;再用醇将核酸沉淀下来,实现核酸与盐的分离。第二种和第三种方法都是利用某些固相介质,在某些特定的条件下,选择性地吸附核酸,而不吸附蛋白质及盐的特点,实现核酸与蛋白质及盐的分离。
核酸提取的原则
保证核酸一级结构的完整性
排除其它核酸分子的污染(如提取DNA时排除RNA的干扰)
核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和高浓度的金属离子
尽可能降低蛋白质、多糖和脂类等大分子物质污染
MolPure®系列试剂盒,理想的核酸提取产品!
MolPure®柱式核酸提取系列试剂盒采用MolPure® DNA/RNA Column和新型的溶液体系,适用于从各种反应体系样品、多种动植物样本、菌体等复杂样本中高效提取和纯化高纯度、高质量的核酸。大部分试剂盒提取过程不需要用到有毒的酚、氯仿等有机物抽提,也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀,操作简便,具有高效、快速、环保等特点。升级版的离心柱能高效结合核酸,不吸附蛋白质、多糖、脂类及其它非核酸类物质,提取的核酸纯度高,可直接用于各种分子生物学实验。
产品类型
样本类型 |
产品名称/货号 |
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多类型样本 |
动物细胞、组织、常规植物样本 |
总RNA提取试剂(同TRIzol)(10606ES) |
总RNA提取试剂盒(带离心柱)(19211ES) |
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各类液体样本 |
液体总RNA提取试剂(同TRIzol LS)(19201ES) |
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医疗样本 |
细胞、组织 |
细胞/组织DNA提取试剂盒(18700ES) |
海洋动物DNA提取试剂盒(18725ES) |
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微量样本DNA提取试剂盒(18780ES) |
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细胞/组织总RNA提取试剂盒(19221ES) |
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培养细胞RNA提取试剂盒(19231ES) |
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细胞/组织miRNA提取试剂盒(19331ES) |
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血液、血清、血浆 |
血液DNA提取试剂盒(18730ES) |
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血清/血浆miRNA提取试剂盒(19332ES) |
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拭子类 |
拭子样本DNA提取试剂盒(18790ES) |
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医疗样本中及培养物中的病毒 |
病毒DNA/RNA提取试剂盒(19321ES) |
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植物样本 |
常规植物样本 |
植物DNA提取试剂盒(18800ES) |
多糖多酚植物DNA提取试剂盒(18801ES) |
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植物RNA提取试剂盒(19291ES) |
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多糖多酚植物RNA提取试剂盒(19292ES) |
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植物miRNA提取试剂盒(19333ES) |
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细菌样本 |
细菌培养物 |
细菌DNA提取试剂盒(18806ES) |
细菌RNA提取试剂盒(19301ES) |
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真菌样本 |
真菌培养物 |
真菌DNA提取试剂盒(18812ES) |
宏基因组样本 |
土壤中的全微生物 |
土壤DNA提取试剂盒(18815ES) |
粪便中的全微生物 |
粪便DNA提取试剂盒(18820ES) |
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质粒样本 |
质粒小量提取试剂盒(19001ES) |
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无内毒素质粒小量提取试剂盒(19021ES) |
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无内毒素质粒大量提取试剂盒(19036ES) |
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DNA产物 |
琼脂糖凝胶回收试剂盒(19101ES) |
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PCR产物纯化试剂盒(19106ES) |
*以上产品除19101,19106ES外,均可参与发文章奖励活动,活动见:https://www.yeasen.com/news/detail/182
产品性能
DNA提取系列产品特点
得率高:产量高达40 µg
DNA纯度高:无蛋白质和RNA污染,可直接用于PCR、酶切和杂交等实验
快速简便:操作过程1 h完成
安全环保:无需使用酚氯仿等有机物抽提
RNA提取系列产品特点
操作简单,操作时间短:30 min内完成单个样本RNA提取。最快11min完成提取步骤。
安全无毒:无需氯仿、异丙醇等有机溶剂抽提。
RNA纯度高:分为柱上DNase I消化和gDNA清除柱两种产品形式。
回收效率高:与TRIzol一致。
应用案例
DNA提取
RNA提取
胶回收和质粒提取试剂盒
图3:500 bp/1 kb PCR产物琼脂糖凝胶回收胶图,19101回收效率略优于T公司同类产品。
产品订购
柱式DNA提取
产品名称 |
货号 |
规格 |
目录价 |
18700ES50/70 |
50/200 T |
433/1583 |
|
18725ES50/70 |
50/200 T |
412/1482 |
|
18730ES50/70 |
50/200 T |
413/1483 |
|
18780ES50/70 |
50/200 T |
/ |
|
18790ES50/70 |
50/200 T |
475/1415 |
|
18800ES50/70 |
50/200 T |
513/1653 |
|
MolPure® Plant Plus DNA Kit 多糖多酚植物DNA提取试剂盒 |
18801ES50/70 |
50/200 T |
/ |
18806ES50/70 |
50/200 T |
413/1483 |
|
18812ES50/70 |
50/200 T |
552/1982 |
|
18815ES50/70 |
50/200 T |
1353/4953 |
|
18820ES50/70 |
50/200 T |
1253/4853 |
质粒DNA提取
产品名称 |
货号 |
规格 |
目录价 |
19001ES50/70 |
50/200 T |
183/573 |
|
19021ES50/70 |
50/200 T |
515/1655 |
|
19036ES10 |
10 T |
1273 |
产物纯化与回收
产品名称 |
货号 |
规格 |
目录价 |
19101ES50/70 |
50/200 T |
263/573 |
|
19106ES50/70 |
50/200 T |
233/573 |
传统总RNA提取
产品名称 |
货号 |
规格 |
目录价 |
10606ES60 |
100 mL |
553 |
|
TRIeasyTM LS Total RNA Extraction Reagent 液体总RNA提取试剂(同TRIzol LS) |
19201ES60 |
100 mL |
2253 |
柱式总RNA提取
产品名称 |
货号 |
规格 |
目录价 |
19211ES60 |
100 T |
1293 |
|
19221ES50 |
50 T |
893 |
|
19231ES50 |
50 T |
1183 |
|
19291ES50 |
50 T |
873 |
|
MolPure® Plant Plus RNA Kit 多糖多酚植物RNA提取试剂盒 |
19292ES50 |
50 T |
/ |
19301ES50 |
50 T |
1253 |
|
19321ES50 |
50 T |
953 |
|
19331ES50 |
50 T |
2353 |
|
19332ES50 |
50 T |
3452 |
|
MolPure® Plant miRNA Kit 植物miRNA提取试剂盒HOT |
19333ES50 |
50 T |
/ |
HB201214
更多产品敬请期待,持续上新中~