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CAR-T细胞疗法全流程

 ——细胞疗法、抗肿瘤效应

1. 背景介绍

CAR-T(Chimeric antigen receptor-T cell),又名嵌合抗原受体T细胞,是一种癌症治疗的新免疫疗法。原理主要是通过基因转导使患者体内的T细胞表达特异性识别肿瘤的嵌合抗原受体(CAR),然后将改造后的T细胞回输至患者体内,从而杀死肿瘤细胞。简单地说,CAR-T就是利用人类的免疫细胞来杀伤肿瘤细胞。

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与已知的抗体药物相比——无论是传统的单克隆抗体药物,抗体偶联药物以及双特异性抗体,CAR-T明显表现出对肿瘤细胞更强的靶向性和杀伤力。根据Dr. Carl June团队的报道和Eureka科研团队的研究表明,CAR-T可以有效杀死细胞表面抗原表达量较低的肿瘤细胞,拷贝数为几十到几百,而抗体介导的抗肿瘤药物只能杀死细胞表面抗原高表达的肿瘤细胞,拷贝数为几千到几万。
 

CAR-T必备、无内毒素----全能核酸酶

CAR-T必备、酶活高----牛痘病毒加帽酶

CAR-T细胞修饰专用----慢病毒包装试剂盒

CAR-T全流程之一----T细胞分离与扩增

CAR-T全流程之二----T细胞修饰

CAR-T全流程之三----安全性评估

CAR-T全流程之五----CAR-T细胞增殖

CAR-T全流程之六----CAR-T细胞回输人体

 

2. CAR-T技术相关流程

1) 分离T细胞:通过外周血血细胞分离机从肿瘤病人血液中分离出单个核细胞,进一步磁珠纯化T细胞。

2) 激活T细胞:通过单克隆抗体、包被磁珠或人工抗原呈递细胞等途径激活T细胞;

3) 修饰T细胞:通过慢病毒包装,病毒侵染T细胞,将CAR 基因转入T细胞中;制备出目的CAR-T细胞;并进行安全性检测。

4) 扩增CAR-T细胞:通过静态或动态培养容器或设备中扩增CAR-T细胞,扩增到所需的细胞数。

5) CAR-T细胞回输入人体:把扩增好的CAR-T细胞通过静脉回输到病人体内,开始进行肿瘤细胞免疫治疗。

6) 监控反应,评估治疗效果。

图片2.png

图1 CAR-T技术基本流程图

 

3. CAR-T技术优势

图片1.png


 

4. CAR-T技术面临的挑战

4.1癌细胞识别方面

无法有效识别癌细胞,T细胞识别的信息是消灭癌细胞的重要证明。如果找不到这个独特的癌细胞的身份信息,很有可能会杀死正常的细胞。所以精确识别癌细胞的身份信息,依然是目前所要克服的困难之一。

4.2引入新的蛋白

用CAR基因修饰T细胞时,一般要引入新的蛋白,这些新的蛋白有可能会被机体识别,被认为是入侵的异物,起免疫反应后直接被杀死。

4.3 细胞因子风暴

用CAR基因修饰T细胞后,T细胞可能膨胀,CAR-T细胞在血液中超速行驶,扰乱体内正常的秩序。这些会引起患者不良反应,如头疼、发热等等。引起的不良反应统称为细胞因子风暴。

4.4脱靶效应、B细胞缺失

CAR-T细胞的靶点是杀死带有CD19的癌变B细胞,可是B细胞本身就带有CD19蛋白。CAR-T细胞在杀死癌变的B细胞的同时,也会杀死正常的B细胞。造成患者B细胞缺失,引起感染。

4.5 CAR-T治疗的神经毒性

目前尚不了解其机制,导致患者头疼,焦虑,脑水肿。

 

5. 相关产品

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

TRIeasyTM Total RNA Extraction Reagent

10606ES60

100 ml

299.00

2×Hieff® PCR Master Mix (With Dye)  

10102ES03/08

1/5 ml

40.00 /150.00

2×Hieff® Robust PCR Master Mix(No Dye)

10105ES03/08

1/5 ml

65.00 /265.00

Hieff® qPCR SYBR® Green Master Mix (No Rox )

11201ES03/08/60

1/5/100 ml

180.00/740.00/12877.00

Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase 第二代耐热逆转录酶

11110ES92/93

10000 /50000 U

626.00/2456.00

Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix

11137ES60

100 T

1193.00

Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase  高保真DNA聚合酶   

10148ES10/60/76/80

10/100/500/1000 U

103.00/683.00/2383.00/4583.00

多片段一步法快速克隆试剂盒

10912ES10/50

10 /5x10 T

457.00/1967.00

T4 DNA Ligase (5 U/µl)

10300ES80

1000 U

425.00

胎牛血清(南美特级)

40130ES76

500 ml  

2458.00

一步法快速支原体检测试剂盒

40611ES25/60  

25/100 T

467.00/1537.00

Hieff Trans®脂质体核酸转染试剂

40802ES03/08

1/5 ml

868.00/3248.00

Lentivirus Concentration Solution 慢病毒浓缩试剂盒

41101ES50

50 ml

1353.00

Lentiviral Packaging Kit 慢病毒包装试剂盒

41102ES10/20/40

10/20/40 T

2553.00/4253.00/7353.00

Benzonase Nuclease全能核酸酶

20156ES25/50/60

25/50 /100 KU

468.00/768.00/1398.00

Vaccinia Capping Enzyme牛痘病毒加帽酶

10615ES76/84/92

500/2000/10000 U

1256.00/3856.00/14856.00

Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit 细胞核/细胞浆蛋白抽提试剂盒

20126ES50/60

50/100 T

935.00 /1545.00

Cell Counting Kit(CCK-8)CCK-8 试剂盒   

40203ES60/76/80

100/500/1000T

150.00/480.00/920.00

Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒

40302ES20/50/60

20/50/100 T

480.00/960.00/1680.00

JC-1线粒体膜电位检测试剂盒

40706ES60

100 T

800.00

TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC)

40306ES20/50/60

20/50/100 T 

1178.00/2680.00/4080.00

TRITC Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽

40734ES75

300 T

1533.00

Clodronate Liposomes(From Vrije Universiteit Amsterdam)体内巨噬细胞清除剂  

40337ES05/10

2/10 ml

1856.00/4376.00

GoldBand 3-color Regular Range Protein Marker(10-180 kDa)三色预染蛋白质分子量标准

20351ES72/76/90

250/500/2500 μl

386.00/676.00/2766.00

GoldBand 3-color High Range Protein Marker(10-245kDa)三色预染蛋白质分子量标准

20352ES76/90

500/2500 μl

786.00 /2996.00

Super ECL Detection Reagent ECL化学发光超敏显色试剂盒  

36208ES60/76

100/500 ml

395.00 /1655.00

 详情请咨询:400-6111-883

HB20191029

400-6111-883