细胞转染技术是一种将外源DNA或RNA导入目标细胞的过程,它在生命科学领域扮演着至关重要的角色。这一技术不仅促进了基因表达研究、基因功能分析、信号传导研究等领域的发展,而且在基因治疗、疫苗开发和药物筛选等方面展现出广泛的应用前景。具体来说,细胞转染技术的应用包括:
基因功能研究
基因敲除和沉默
肿瘤研究
疫苗生产
基因治疗
药物筛选
此外,细胞转染技术还涉及到miRNA和mRNA的研究与应用。miRNA通过调节特定基因的表达,在细胞周期调控、细胞分化、免疫应答、发育调节等过程中发挥作用,异常的miRNA表达与多种疾病的发生发展相关。而mRNA转染作用则是指将体外合成的mRNA导入到细胞内,利用细胞内的翻译系统将mRNA翻译成目标蛋白质,这种技术在mRNA疫苗研发和mRNA药物生产中具有重要应用。
图1.细胞转染示意图[1]
293细胞系,以其卓越的转染效率和稳定的外源基因表达特性,在生物医学研究领域占据核心地位。这些细胞系源自人类胚胎肾脏细胞,通过腺病毒DNA片段转化而得到,实现了细胞的永生化。它们不仅在病毒载体的制备中发挥关键作用,尤其是在腺相关病毒、慢病毒的及重组蛋白的高效表达方面显示出巨大潜力。广泛应用于基因治疗、疫苗开发、药物生产以及结构生物学研究等多个领域,成为现代生物技术不可或缺的工具。
到目前为止,根据不同的研究与生产需求,已经人为地建立了许多HEK293细胞的亚型和衍生细胞系,主要有293T、293H、293F和293S四大分支。
图2.HEK293细胞及其衍生细胞系起源[2]
293细胞系具有以下显著特点:
高转染效率:293细胞系对外源DNA具有较高的摄取率,这归因于它们能够表达某些促进DNA进入细胞的病毒基因。
易于培养及扩增:293细胞生长迅速且相对容易维护,这对于需要快速且可靠结果的实验是有益的。
适应性强:293细胞可以在多种条件下生长,包括贴壁或悬浮培养,这使得它们适合大规模蛋白质生产。
人源细胞系:作为人源细胞系,它们为人类生物学提供了更相关的生物学背景,这在治疗研究中尤其重要,因为人源细胞的反应可以预测体内结果。
多功能性:它们能够产生具有复杂翻译后修饰的蛋白质,这一特征对于许多蛋白质(尤其是治疗性抗体)的功能至关重要。
此外,293细胞系的多功能性延伸至复杂蛋白质的生产,包括单克隆抗体、生物仿制药及细胞与基因治疗药物,用于治疗癌症、自身免疫性疾病和其他疾病。它们精确折叠和修饰蛋白质的能力使它们成为重组蛋白质生产行业的首选。因此,293细胞系不仅在基础科研中发挥着重要作用,而且在生物医药产业中也扮演着关键角色,特别是在疫苗、蛋白质生产及病毒包装中的作用不可忽视。
Hieff Trans® 293 Transfection Reagent 是一款专为293细胞系设计的高效转染试剂,它不仅适用于HEK(人胚肾)293贴壁细胞的瞬时转染,还兼容293F、Expi293F等多种293悬浮细胞系高密度转染。此外,Hieff Trans®293 Transfection Reagent 的高效性体现在其能够显著提升293F细胞中的蛋白表达水平,以及病毒包装产量,这对于需要大量重组蛋白的生产和病毒包装研究至关重要。
应用场景
抗体及重组蛋白表达
慢病毒LV及腺相关病毒AAV等病毒包装
产品特征
适用于贴壁及悬浮293细胞系高密度生产
广泛用于蛋白表达及病毒包装
案例展示
在悬浮293F细胞中,转染GFP质粒,质粒DNA:转染试剂=1:2;结果显示Hieff Trans® 293 Transfection Reagent 293专用转染试剂在悬浮293F细胞上有很高转染效率。
图3.悬浮293F细胞转染效果图
产品信息
产品名称 |
产品规格 |
产品货号 |
1 mL /10 mL /100mL |
40818ES03/10/60 |
相关产品
产品名称 |
产品规格 |
产品货号 |
100 μL/1 mL |
40802ES01/03 |
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200T |
40803ES70 |
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500 μL/5×500 μL |
40804ES76/86 |
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100μL/1mL |
40806ES01/03 |
|
0.5 mL /1 mL |
40808ES02/03 |
|
100μL/1mL |
40809ES01/03 |
|
1.5 mL /10 mL /100 mL |
40820ES04/10/ES60 |
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10 mL /100 mL/1L |
40821ES10/60/80 |
|
1 mL /10 mL /100mL |
40823ES03/10/60 |
|
10 mL /100mL/1L |
40824ES10/60/80 |
参考文献:
[1] Guo X, Ma Y, Wang H, Yin H, Shi X, Chen Y, Gao G, Sun L, Wang J, Wang Y, Fan D. Status and developmental trends in recombinant collagen preparation technology. Regen Biomater. 2023 Nov 29;11:rbad106. doi: 10.1093/rb/rbad106. PMID: 38173768; PMCID: PMC10761200.
[2] Lin YC, Boone M, Meuris L, et al. Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations. Nat Commun. 2014;5:4767. Published 2014 Sep 3. doi:10.1038/ncomms5767