翌圣Hieff Clone^®系列克隆试剂盒，历经数次迭代与优化，如今已囊括了从基础克隆到高通量、高效能的一站式分子克隆系列解决方案，既含有用于载体构建、基因突变等的通用型一步法快速克隆试剂盒，又含有用于测序、储存DNA片段的通用型TOPO克隆试剂盒（兼容TA和平末端）。

翌圣分子克隆试剂盒操作步骤

翌圣Hieff Clone^®系列克隆试剂盒自2017年诞生至今，客户好评不断，每年均有客户使用克隆试剂盒产品发表高分文章，包括Nature、Cell等多个顶级期刊，获得科研大牛们认可！据不完全统计，截至2024年10月31日，翌圣克隆试剂产品多年来累计参与发表文章173篇文章，累计影响因子达1388.86，包括一步法快速克隆试剂盒和TOPO克隆试剂盒。

 

最新通用型产品推荐

产品分类	产品定位	产品名称	产品货号	规格
快速克隆试剂盒	1-7片段一步法定向连接，最快5分钟完成重组反应	Hieff Clone® Universal II One Step Cloning Kit	10923ES20/50	20 T/50 T
TOPO克隆试剂盒	兼容TA/平末端克隆	Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit	10906ES08/20	5 T/20 T

 

通用型多片段一步法快速克隆试剂盒

小翌强烈推荐翌圣通用型多片段快速克隆试剂盒（Cat#10923ES），满足6 μL小体系、10 ng低浓度载体与片段的连接，菌落数多，克隆阳性率高，客户反馈效果好！（右戳申请试用☞ 试用装申请）

 

一步法克隆与传统酶切克隆方法的比较

方法	插入片段制备	酶切位点限制	通用性	连接时间	阳性率
一步法快速重组克隆技术	1步纯化	无	★★★★★	最快5 min	高达95%
酶切连接克隆技术	2步纯化	有	★★	过夜	不同基因差别大

 

优势性能

• 定向：可满足1-7个DNA片段的定向无缝拼接
• 简便：片段无需酶切，多片段连接一管内即可完成
• 快速：最快5分钟即可完成连接反应
• 高效：克隆生长数多，克隆阳性率可达95%以上
• 广泛：适用于任何载体，兼顾粘性和平末端；可用于多片段、点突变等的克隆
• 超长：载体片段连接长度可达25 kb以上

 

性能展示

• 单片段6 μL小体系高效重组

图1. 在6 μL小体系非复苏感受态下，连接10 ng低投入量单片段。结果显示，10923ES性能好于竞品，连接效率高，菌落数多，阳性率达100%。A-B：重组转化平板。载体（10 kb）和插入片段（1 kb）摩尔比为1:2。C：插入片段PCR鉴定电泳图，M：Yeasen 10505ES。

• 低浓度多片段高效重组

图2. 分别连接低浓度的五片段和六片段。结果显示，10923ES在低浓度下连接性能稳定，菌落数多，阳性率100%。A-B：重组转化平板。载体（11.6 kb）和插入片段（5片段共5.6 kb、六片段共7.6 kb）摩尔比为1:2。C-D：插入片段PCR鉴定电泳图，M：Yeasen 10505ES，菌P长度2.6 kb。

 

客户体验反馈专区

01 高效、快速小体系单片段连接

图3. Hieff Clone^® Universal II One Step Cloning Kit 10 μL小体系单片段连接和点突变克隆，阳性率100%。A&C：重组转化平板。B：插入片段PCR鉴定电泳图，泳道1-5分别为菌落1，菌落2，阴性对照，阳性对照（基因组作为模版），阳性对照（PCR纯化片段作为模版）。D：插入片段PCR鉴定电泳图。

 

02 高效、快速多片段连接

图4. Hieff Clone^® Universal II One Step Cloning Kit多片段连接，阳性率100%。A&C：重组转化平板。B：插入片段测序鉴定图。D：插入片段PCR鉴定电泳图。

 

通用型TOPO克隆试剂盒

小翌强烈推荐翌圣零背景通用型TOPO克隆试剂盒（Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit，Cat#10906ES），利用新一代拓扑异构酶(Topoisomerase)的原理，搭配高效的平末端化因子，仅需5 min快速克隆连接平末端产物和粘性末端产物，操作简单，连接效率极高，克隆阳性率接近100%，客户反馈效果好！（右戳申请试用☞ 试用装申请）

 

TOPO克隆与传统TA克隆方法的比较

方法	反应时间	反应温度	体系组成	克隆阳性率	PCR产物
TOPO克隆技术	5 min	室温	载体+插入片段	★★★★★	载体无需加“A”
传统TA克隆技术	过夜	16℃	载体+插入片段+T4连接酶	★★	需要加“A”

 

优势性能

• 快速：仅需5分钟即可完成连接反应。
• 高效：无自连现象，阳性克隆率接近100%，无需设置蓝白斑筛选。
• 连接片段：可连接150 bp-5 kb目的产物。
• 简便：只需加入纯化后目的片段即可。
• 兼容性广：添加平末端因子，兼容TA克隆与平末端克隆。

 

性能展示

• 平末端/粘性末端片段高效连接

图5. 相同体系下，分别投入200 bp粘性末端片段、1 kb粘性末端片段、2 kb平末端片段、4 kb平末端片段进行连接，结果显示，Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit试剂盒可以兼容粘性末端和平末端片段TOPO克隆。

 

客户体验反馈专区

• 平末端克隆高效连接

图6. 3000 bp（120 ng）平末端片段连接，Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit连接效率高，菌落数多，阳性率100%。A：连接转化平板。B：插入片段PCR鉴定电泳图。

• 粘性末端片段高效连接

图7. 100 bp-500 bp（50 ng）粘性末端片段连接，与进口产品相比，10906ES连接效率高，菌落数多，4组样品各挑10个单克隆，所有有效单克隆全为成功插入，阳性率100%。A&B：连接转化平板。C：插入片段测序鉴定图。

 

Hieff Clone^®系列克隆产品近年来助力高分文章成果

• 2017年
• 研究团队：中国科学院分子细胞科学卓越创新中心陈玲玲课题组
• 发表期刊：Cell
• 影响因子：30.410
• 翌圣产品：Hieff Clone^® One Step Cloning Kit（该货号已下架）

 

 

• 2018年
• 研究团队：浙江大学生物医学工程与仪器科学学院
• 发表期刊：Molecular Cell
• 影响因子：14.548
• 翌圣产品：Hieff Clone^® Plus One Step Cloning Kit（Cat#10911ES）

• 2019年
• 研究团队：中国科学院分子细胞科学卓越创新中心
• 发表期刊：Cell
• 影响因子：36.216
• 翌圣产品：Hieff Clone^® One Step Cloning Kit（该货号已下架）

 

• 2020年
• 研究团队：北京工商大学植物资源研究与开发北京市重点实验室
• 发表期刊：Nature Communications
• 影响因子：12.121
• 翌圣产品：Hieff Clone^® Plus Multi One Step Cloning Kit（Cat#10912ES）

• 2021年
• 研究团队：中国科学院分子细胞科学卓越创新中心
• 发表期刊：Molecular Cell
• 影响因子：17.970
• 翌圣产品：Hieff Clone^® One Step Cloning Kit（该货号已下架）

• 2022年
• 研究团队：华东理工大学药学院
• 发表期刊：Cell Metabolism
• 影响因子：31.373
• 翌圣产品：Hieff Clone^® Plus One Step Cloning Kit（Cat#10911ES）

• 2023年
• 研究团队：中国科学院分子细胞科学卓越创新中心
• 发表期刊：Nature
• 影响因子：69.504
• 翌圣产品：Hieff Clone^® Plus One Step Cloning Kit（Cat#10911ES）

• 2024年
• 研究团队：武汉大学生命科学学院
• 发表期刊：Nature Microbiology
• 影响因子：30.964
• 翌圣产品：Hieff Clone^® Plus One Step Cloning Kit（Cat#10911ES）

 

相关产品

产品系列	产品定位	名称	货号	规格
一步法快速克隆试剂盒	单片段一步克隆，已发文章累计IF达到1000+	Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit一步法快速克隆试剂盒	10911ES20/50	20 T/50 T
	1-6片段一步克隆，最快5分钟完成重组反应	Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit通用型一步法快速克隆试剂盒	10922ES20/50	20 T/50 T
TOPO克隆试剂盒	替代TA连接克隆	Hieff Clone® Zero TOPO-TA Cloning Kit	10907ES20	20 T
	替代TA连接克隆（不含MCS多克隆位点）	Hieff Clone® Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted	10908ES20	20 T
	替代平末端连接克隆	Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Cloning Kit	10909ES20	20 T
	替代平末端连接克隆（不含MCS多克隆位点）	Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Simple Cloning Kit, MCS-Depleted	10910ES20	20 T
感受态细胞	5 min快速完成感受态转化	DH5α Fast Chemically Competent Cell F DH5α化学感受态	11803ES80	10×100 μL
	常规感受态细胞	TOP10 Chemically Competent Cell TOP10化学感受态细胞	11801ES80	10×100 μL
	常规感受态细胞	DH5α Chemically Competent Cell DH5α 化学感受态细胞	11802ES80	10×100 μL
	常规感受态细胞	BL21(DE3) Chemically Competent Cell BL21(DE3)化学感受态细胞	11804ES80	10×100 μL
高保真PCR	5s/kb，保真保快	2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye)	10164ES03/08	1 mL/5×1 mL
快速PCR	快速PCR升级，可菌P且适用复杂模板扩增	2×Hieff® Ultra-Rapid II HotStart PCR Master Mix	10167ES03/08	1 mL/5×1 mL