近些年的体外诊断，接连遇到分子诊断和POCT即时诊断两个重要风口，冻干形式的分子诊断试剂在全球受到了越来越多的应用。冻干关键原料的选择和研制，影响体外诊断试剂各个项目的性能水平和应用价值，筛选到合适的原料是最重要的研发工作，也是诊断试剂成本构成的最主要部分。

冻干试剂的研发包括原料与辅料的选择、研发工艺与设备的选择等，由于各个领域交叉相互干扰，研发周期可能会失控。以冻干原料筛选过程为例，冻干原料的筛选涉及原酶开发、原酶筛选、试剂开发、冻干打样测试等环节。具体筛选过程如下图所示：

图1.冻干原料筛选过程

那如何能够快速研发出分子诊断冻干试剂呢？

可以考虑市面上用标准引物探针测试过冻干前后性能均稳定的试剂原料、冻干保护剂，参考冻干工艺，再搭配具体项目的引物探针进行测试，若测试通过则可以安排全体系冻干微芯打样实验，并测试性能，性能通过即可转产放大，若测试不通过则可以与原料厂家进行定制化的优化调试。

翌圣生物作为深耕于上游生命科学领域酶制剂的供应商，长期为IVD公司提供高品质、高性价比的原料酶。且可为客户提供定制优化服务，尽可能缩短冻干试剂的研发周期。

Hifair^® Lyo Multiplex One Step RT-qPCR Kit（Cat#11831）

该原料含有基因改造的双封闭抗体封闭的Taq酶及深度优化的多重反应缓冲体系，可极大地提高扩增灵敏度和特异性。由4×buffer、酶mix及冻干保护剂三个组分组成，便于液体版各组分体系微调。既可作为液体试剂直接使用，同时匹配冻干保护剂，可以直接用于冻干，进行冻干产品的开发。

图2. 使用Yeasen的RNA可冻干试剂（Cat#11831ES）分别进行原位冻干和冻干微芯，观察冻干产品的冻干形态：冻干后冻干形态良好，原位冻干表面无塌陷，管内无空隙；冻干球形态饱满圆滑，大小均一。

图3.使用Yeasen的RNA可冻干试剂（Cat#11831ES）冻干成冻干微芯后，在不同条件下（正常保存为T0时刻，50℃加速14天及25天）进行处理，同时扩增10⁵ 、10⁴、10³ copies/mL的新冠假病毒模板，结果显示：冻干微芯热加速前后Ct值、荧光值、球形等均无显著变化，冻干产品稳定性良好。

图4.使用Yeasen的RNA可冻干试剂（Catt#11831ES）冻干成冻干微芯后，进行热加速处理，同时使用普通程序和超快速程序检测IVA、IVB 及内参模板，两者Ct值、荧光值无显著差异。由此可见：11831 ES冻干微芯T0时刻及热加速后的产品，兼容常规程序和快速程序，性能稳定。