想快速区分不同胰蛋白酶？这三点是关键！
胰蛋白酶
理化性质
胰蛋白酶是从牛、猪、羊的胰脏提取，通过多重结晶方式纯化，并进一步采取层析及超滤技术制备而得。该酶易溶于水，不溶于三氯甲烷、乙醇、乙醚等有机溶剂。在pH1.8时，酶短时间煮沸几乎不失活，在碱溶液中加热则会变性沉淀。Ca2+对酶有保护和激活作用，胰蛋白酶的等电点为pH10.1。胰蛋白酶作为肽链内切酶，对精氨酸和赖氨酸肽链具有选择性水解作用。早期的胰蛋白酶在生物制药领域的主要应用是胰岛素的生产，很快也在其他细胞培养领域应用起来。动物胰酶普遍用于血清培养，不同细胞加入的酶浓度不一样。
应用范围
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胰岛素、灭活疫苗生产
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组织细胞分离及培养
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临床外科使用
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食品行业加工助剂
重组胰蛋白酶
理化性质
重组胰蛋白酶是一种使用基因工程技术生产的酶，具有稳定性好、纯度高、无动物来源的优点。市场主流的重组胰蛋白酶是利用DNA重组技术在大肠杆菌或酵母中表达的重组猪胰蛋白酶，其氨基酸序列与猪胰蛋白酶完全一致，具有与天然胰蛋白酶相同的活性和特异性。其由223个氨基酸构成，含有6对二硫键。该酶包含两种胰蛋白酶活性形式：α-胰蛋白酶和β-胰蛋白酶。其活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如PMSF和TLCK等、金属离子螯合剂如EDTA等的抑制。重组胰酶用于无血清培养，同胰蛋白酶一样，不同细胞加入的酶浓度不一样。
应用范围
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疫苗和重组胰岛素生产
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细胞分析的组织样本制备
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免疫细胞治疗
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生物药物生产
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蛋白质序列、结构及组学研究
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分类 |
胰蛋白酶 |
重组胰蛋白酶 |
重组胰蛋白酶（质谱级） |
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来源 |
取自牛、猪、羊的胰脏 |
大肠杆菌或酵母重组表达 |
毕赤酵母重组表达 |
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安全性 |
潜在病原污染 |
无外源性病毒污染 |
无外源性病毒污染 |
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纯度 |
1：250胰蛋白酶溶液中90%以上为杂质 |
高纯度（β-trypsin≥70%， α-trypsin≤20%） |
高纯度（β-trypsin>80%， α-trypsin<20%） |
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糜蛋白酶限量 |
每2500单位胰蛋白酶中不得多于50单位的糜蛋白酶。 |
无糜蛋白酶等杂酶污染 |
无糜蛋白酶等杂酶污染 |
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比活 |
/ |
≥3800 USP units/mg 蛋白 |
>6800 USP units/mg蛋白 |
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消化效果 |
不稳定 |
消化能力强，酶用量少 |
消化能力强，酶用量少 |
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自切率 |
容易自切产生自身自切片段影响质谱分析结果 |
容易自切产生自身自切片段影响质谱分析结果 |
经过特殊处理保证其不自切 |
Maarof Manira[1]等人研究了不同胰酶对皮肤细胞培养的影响。在这项研究中，全层人皮肤经过胶原酶消化后释放成纤维细胞，分别使用胰蛋白酶EDTA溶液（TE）和重组胰蛋白酶溶液（TS）处理细胞，发现在细胞的培养扩增过程中，用TE或TS处理的人角质形成细胞和成纤维细胞的总细胞产量相当（见图1）；通过定量RT- PCR和免疫细胞化学方法（ICC）分析TE和TS对I型胶原（Col-I）、III型胶原（Col-III）、细胞角蛋白10（CK10）和细胞角蛋白14（CK14）的基因和蛋白表达水平影响，发现与TE相比，TS除Col-III外的皮肤特异性基因表达更高，蛋白表达水平相似（见图2,4）。研究数据反馈，重组胰蛋白酶（TS）表现出更温和的消化效果，能够保持高细胞活力和细胞产量。
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产品名称 |
货号 |
规格 |
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PerfCell™ Trypsin-EDTA (0.25%), Phenol red 胰酶-EDTA溶液（0.25%），无酚红 |
100 mL |
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PerfCell™ Trypsin-no EDTA (0.25%), no phenol red 胰酶-无EDTA溶液（0.25%），无酚红 |
100 mL |
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PerfCell™ Trypsin (0.25%), phenol red 胰酶溶液（0.25%），含酚红 |
100 mL |
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PerfCell™ Trypsin-EDTA (0.25%), Phenol red 胰酶-EDTA溶液（0.25%），含酚红 |
100 mL |
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Trypsin 1:250(powder) 胰蛋白酶1:250(粉末) |
25 g |
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PerfCell™ Recombinant Trypsin（powder）重组胰蛋白酶（粉末） |
10 mg/100 mg |
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Recombinant Trypsin（MS-SAFE）重组胰蛋白酶（质谱级） |
100 µg |
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PerfCell Tryzyme™Express 酶 (1X)，含酚红 |
100 mL |
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PerfCell Tryzyme™Express 酶 (1X)，无酚红 |
100 mL |
参考文献：
[1]Manira M, Khairul Anuar K, Seet WT, Ahmad Irfan AW, Ng MH, Chua KH, Mohd Heikal MY, Aminuddin BS, Ruszymah BH. Comparison of the effects between animal-derived trypsin and recombinant trypsin on human skin cells proliferation, gene and protein expression. Cell Tissue Bank. 2014 Mar;15(1):41-9.
