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上新 | 双链甲基化建库重磅上市,助力表观遗传学研究

01
表观遗传
1942 年,Conrad Waddington 创造出了“表观遗传学”一词,用以定义基因型未发生改变而表型改变的现象,以解释发育的各个方面。大约 3/4 个世纪以后,我们发现基因表达模式传递的表观遗传机制并不依赖于 DNA 序列的改变,而是通过改变染色质的状态,而染色质状态同时是我们遗传信息的生理学形式。表观遗传的调控机制包括多种方式,图1主要介绍其中的3种:DNA甲基化、组蛋白修饰(图1中显示乙酰化和甲基化修饰)和非编码RNA导的调控。

 

 

02
表观遗传与人类疾病
DNA甲基化、组蛋白修饰、非编码RNA等表观遗传因素,与肿瘤发生、免疫缺陷病、神经系统疾病、心血管疾病和精神疾病等多种疾病相关。DNA甲基化就像一顶“神奇的帽子”,在不改变DNA分子一级结构的情况下调节基因组的功能,在调控基因表达、维持染色质结构、基因印记、X染色体失活以及胚胎发育等生物学过程中发挥着重大的作用。
 
01
肿瘤

正常的DNA甲基化模式如果被破坏(如基因启动子区域的甲基化程度过高或过低)都会导致细胞的癌变。

 
02
免疫缺陷疾病

ICF综合征,是由DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)基因突变而引起的。患者1号、9号和16号染色体异常,在其着丝粒附近具有大量重复的典型卫星DNA序列,这些重复序列表现为低甲基化。

 
03精神类疾病

瑞特综合征是由于X染色体上编码MeCP2转录因子的基因突变导致的。MeCP2突变导致该基因调节DNA甲基化的过程异常,从而致病。

 

DNA甲基化研究离不开甲基化转化和甲基化建库

甲基化建库的方式有哪些呢?

 

 

翌圣生物最新推出先建库后转化的甲基化研究方案,与您一起探索DNA甲基化的奥秘!

 

03
产品简介

Hieff NGS® dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina®是针对Illumina®高通量测序平台开发的双链DNA甲基化建库试剂盒。本试剂盒通过连接相应的甲基化接头,经亚硫酸氢盐或酶法转化处理,再经过一步扩增即可构建针对Illumina®平台测序的甲基化文库。

04
产品亮点

 

  • 所有组分均通过质量控制和功能验证,以确保文库的稳定产出;
  • 支持多种类型DNA样本,包括gDNA、cfDNA和FFPE等;
  • 兼容10 ng-1000 ng DNA的样本投入量,并兼容市面主流的转化方案
 

 

05
建库原理

图2.双链甲基化建库原理

 

06
产品性能
01
文库产量及下机数据对比测试
 
 

选择不同的样本进行机械法片段化(除cfDNA),包括10ng 、100ng、1μg的293T gDNA,50ng FFPE DNA,100ng 水稻 DNA和10ng cfDNA,样本中掺入1% λDNA,采用Hieff® Mag DNA Methylation Bisulfite Kit(12223ES)进行文库转化和Hieff NGS® dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina(12214ES)进行双链甲基化建库,性能评估结果如下:

 

12214文库产量、Mapping(%)、Clean/Raw(%)、Dup%优于竞品1!

 

图3.不同样本不同投入量的文库浓度

 

图4.不同样本不同投入量的Clean/Raw(%)

 

图5.不同样本不同投入量的Map Ratio(%)

 

图6.不同样本不同投入量的Dup(%)

 

甲基化双链建库,λ DNA的转化率>99.8%!

 

图7.双链甲基化建库对样本转化率的评估

 

07
Hot 订购信息

 

 

产品名称

产品货号

产品规格

Hieff NGS® dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina®双链DNA甲基化建库试剂盒

12214ES08

8T 

12214ES24

24T

12214ES96

96T

08
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产品名称

产品货号

产品应用

Hieff® DNA Bisulfite  Conversion Kit

12222ES

 

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Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase

10145ES

甲基化转化后PCR扩增

400-6111-883