传统的分子酶或预混液往往含有高浓度的甘油作为冷冻保护剂和稳定剂,但试剂中的甘油会破坏水的结构导致水分难以去除,从而影响冻干产品的结构和稳定性,因此冻干时要优先选择不含甘油的试剂。此外,在那些对试剂成分敏感的应用(如数字PCR)中,使用高浓度无甘油分子酶可以进一步降低甘油对数字PCR反应的影响,同时扩大数字PCR检测试剂体系优化的空间。
图1.切向流过滤系统原理示意图
图2.切向流过滤系统实验流程
表1.翌圣无甘油分子酶产品清单
无甘油分子酶产品:37℃加速54天性能稳定
图3.无甘油分子酶产品测试数据
RT-qPCR冻干产品:50℃加速25天,冻干品形态和性能稳定
使用Yeasen 13705ES配制成RT-qPCR预混液,冻干后进行50℃加速25天稳定性测试,同时扩增105、104、103 copies/mL的新冠假病毒模板。结果显示:冻干品加速前后产品形态、Ct值和荧光值均无显著变化,冻干产品稳定性良好。
图4.RT-qPCR冻干产品加速稳定性测试数据
RT-LAMP冻干产品:45℃加速30天,冻干品形态和性能稳定
图5.RT-LAMP冻干产品测试数据