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新品│Endonuclease VIII：精准切割DNA受损碱基，助力基因损伤修复研究

 

核酸内切酶 Ⅷ(Endonuclease VIII, Endo Ⅷ)是一种具有N-糖基化酶活性(N-glycosylase)和AP-裂解酶(AP-lyase)活性的DNA损伤修复酶，参与氧化产生的DNA损伤的碱基切除修复。

 

 

 
作用原理
Endonuclease VIII识别双链DNA上受损碱基并在其N-糖基化酶活性作用下切除双链DNA上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘌呤(AP)位点。随后，在其AP裂解酶活性作用下切割AP位点的3'和5'端，产生一个具有3'和5'磷酸的碱基缺口。

 

图1. Endonuclease VIII反应原理示意图

 

 

 
翌圣Endonuclease Ⅷ

翌圣的Endonuclease Ⅷ（Cat#14536ES）由分子酶改造平台——ZymeEditor™重组表达而来，高纯度，无核酸外切酶、核酸内切酶以及RNase残留。可应用于单细胞凝胶电泳、NGS建库中DNA损伤修复、酶法合成DNA中释放DNA链、碱洗脱，搭配UDG(Cat#10303ES)进行含U片段的克隆等。

 

 

 
数据展示
01
受损碱基切除效果与进口品牌一致
 
 
分别使用翌圣与进口品牌N*的Endonuclease Ⅷ催化20 pmol寡聚核苷酸，20 µL反应体系中加入5~40 U的Endonuclease Ⅷ 和相同酶活的UDG(Cat#10303ES)，37℃孵育1 h。琼脂糖凝胶电泳检测结果表明，翌圣Endonuclease Ⅷ与进口品牌N*的碱基切除效果一致。

 

图2. 受损碱基切除效果对比

 

02
无核酸外切酶、核酸内切酶、RNase残留
 
 
将10 U Endonuclease VIII分别与相应的底物DNA/RNA在37℃孵育4 h，琼脂糖凝胶电泳检测结果表明，Endonuclease VIII 无核酸外切酶、核酸内切酶、RNase残留。

 

图3. 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase残留检测结果

 

 

 
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定位

产品名称

产品货号

/

识别并切除受损碱基

Endonuclease VIII (10 U/μL)

14536ES

含U片段的克隆

与Endo Ⅷ搭配使用

Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG),heat-labile​(1 U/μL)

10303ES

耐U高保真酶

Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase (3 U/μL) 

14384ES

核酸电泳

Agarose琼脂糖

10208ES

YeaRed Nucleic Acid Gel Stain(10,000× in Water)

10202ES

Gold Band系列marker

10501ES-10518ES

转化与鉴定

抗生素

羧苄，卡那，潮霉素B等

/

感受态细胞

TOP10 、DH5α ，BL21等

11801ES-11803ES

 

 

400-6111-883