环介导等温扩增(loop mediated isothermal amplification,LAMP)使用具有链置换特性的Bst DNA聚合酶,在等温条件下高效、快速、特异性扩增靶标序列,可在15-60分钟内实现109-1010倍的扩增。等温扩增因其反应快速、特异高、设备简单易操作、结果易于鉴定等优点,已经应用于病原菌、寄生虫、病毒、疾病和转基因产品检测等领域,并且还将广泛应用于临床传染病诊断、环境监测、食品安全等领域,已经成为一种适用于分子POCT平台的理想方法。
LAMP检测方法分为多种,包括比浊法、pH显色法、荧光染料法(如NHB、钙黄绿素、SYBR Green、Syto等)、荧光探针法等。我司最新开发的LAMP检测试剂盒具有灵敏度高、引物适用性好、在特异性、耐受性和稳定性上均有较为优秀的表现。在与同类产品的对上,具有较为明显的优势。
LAMP与PCR扩增对比
pH显色法RT-LAMP是将可视染料作为敏感指示剂,在60-65℃等温条件下,利用恒温水浴锅或普通PCR仪完成一步法RNA核酸扩增。30min即可通过反应后颜色的变化,判断是否感染病原体,结果更直观(阳性为橙黄色,阴性为洋红色)。该方法适用于大批量人群的快速检测。
RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit(13906ES)
RT-LAMP pH Sensitive Dye Chromogenic Version Freeze-Dryable Kit(13920)(可冻干版)
灵敏度、特异性
稳定性
荧光染料法RT-LAMP是将荧光染料(如SYBR Green、Syto等)作为荧光标记物,在扩增反应中与双链DNA结合后,荧光信号会增强800-1000倍。使用荧光定量PCR仪在60-65℃恒温条件下进行测试,约30min后即可通过扩增结果判断是否感染病原体,还可搭配微流控芯片或便携式检测仪快速检测。
RT-LAMP Dye Assay Kit(UDGplus)(13762ES)