在使用传统高保真酶进行PCR时,难免会遇到一些棘手的问题。例如保真度不够,扩增得到的片段测序后发现仍有目的碱基发生突变或缺失。扩增的时间也相对漫长,有时扩增5kb的片段也要花费将近2个小时的时间。现小翌推出一款快速高保真PCR以解决您的烦恼!--Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (超快速高保真酶预混液)
2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye)
保真性高:低错配率,高GC易突变序列中碱基错配比231/300000;
扩增速度快:延伸速度快至5 sec/kb;
适用性广:可覆盖20-80%GC含量的基因,耐受小鼠裂解物和20%的血液;
稳定性好:37℃下存放7d,不影响产品性能;
快速简便:只需加入引物和模板即可进行扩增,带有上样染料,可直接电泳;
以不同物种基因组为模板,选取6段GC rich、极易发生碱基突变/丢失的片段进行扩增,将各自PCR产物克隆至载体,并对每种序列挑取100个单克隆进行测序以确认碱基序列错配/突变情况。结果显示快速高保真酶预混液(10164ES)发生碱基错配/突变的比例优于国内外品牌试剂。
使用快速高保真酶预混液(10164ES)和T产品均以5 sec/kb的延伸速度从100 ng人基因组模板扩增不同长度片段(0.4-10 kb),延伸时间均要求为5 sec/kb。结果显示,快速高保真酶预混液(10164ES)在10kb以内的片段均可以5 sec/kb的延伸速度扩增。Marker: Yeasen 10510ES。
使用快速高保真酶预混液(10164ES)从人gDNA模板中扩增23-76% GC含量片段,延伸时间设置5 sec/kb。结果显示,产品扩增特异性良好,能兼容不同GC含量片段扩增。Marker: Yeasen 10510ES。
使用快速高保真酶预混液(10164ES)从不同样本中扩增不同长度片段,延伸时间设置5-10 sec/kb。结果显示本产品扩增特异性良好,能兼容不同模板的不同片段扩增。
注:1.小鼠gDNA 1 kb;2.小鼠gDNA 2 kb;3.小鼠gDNA 6 kb;4.玉米gDNA 1 kb;5.水稻gDNA 2 kb-A;6.水稻gDNA 2 kb-B;7.人293细胞cDNA 1 kb;8.人293细胞cDNA 2 kb ;9.人293细胞cDNA 3 kb;10.人293细胞cDNA 12 kb;11.大肠杆菌菌液8 kb;12.大肠杆菌菌液16 kb;13.水稻gDNA 10 kb-A;14.水稻gDNA 10 kb-B;15.水稻gDNA 10 kb-C;16.水稻gDNA 20 kb-A;17.水稻gDNA 20 kb-B;18.人血液直扩3 kb。Marker: Yeasen 10510ES
用快速高保真酶预混液(10164ES)分别对拟南芥、油菜、马铃薯0.5-10 kb 不同GC含量的片段进行扩增,延伸时间5 sec/kb,结果显示快速高保真酶预混液(10164ES)可保证扩增。Marker: Yeasen 10510ES。
用快速高保真酶预混液(10164ES)分别对拟南芥、油菜、果蝇、秀丽线虫和斑马鱼中随机序列(序列随机拉取),0.5-10kb覆盖20-80%GC含量的片段进行扩增,延伸时间5 sec/kb,结果显示快速高保真酶预混液(10164ES)检出率高。
使用37℃热加速放置3 d和7 d的快速高保真酶预混液(10164ES)分别扩增100 ng人基因组中3 kb和5 kb的DNA片段,延伸时间设置5 sec/kb。结果显示产品具有不错的稳定性。Marker: Yeasen 10510ES。
客户评价:PCR过程速度快,条带合适,可在琼脂糖电泳中直接上样。进口N品牌的条带偏上,可能是自身的buffer影响,且未添加loading buffer,该产品可替代目前我的实验方案中的高保真酶。
客户评价:与进口T品牌相比,克隆条带更加清晰单一,整个PCR时间也更快,跑胶时不用再额外加染料,非常方便快捷。
客户评价:与国产V品牌相比,效果相当,个人感觉更佳。
客户评价:效果很好,条带清楚。
产品定位 | 产品名称 | 产品货号 |
---|---|---|
5s/kb,保真保快(带电泳染料) |
2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye) |
10164ES |
5s/kb,保真保快(不带电泳染料) |
2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix |
10163ES |
83×Taq,检出率高(带电泳染料) |
2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix(With Dye) |
10154ES |
83×Taq单酶+Buffer分开 |
Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase |
10153ES |
52×Taq,常规高保真Mix |
2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix |
10149ES |
52×Taq单酶+Buffer分开 |
Hieff Canace® Gold High Fidelity DNA Polymerase |
10148ES |
产品定位 |
产品名称 |
货号 |
规格 |
TA/平末端通用型高效拓扑克隆 |
Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit |
20 T |
|
平末端拓扑克隆 |
Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Cloning Kit |
20 T |
|
平末端拓扑克隆,不含多克隆位点 |
Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Simple Cloning Kit |
20 T |
|
单片段同源重组克隆 |
Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit |
20/50 T |
|
1-7片段通用同源重组 |
Hieff Clone® Universal II One Step Cloning Kit |
20/50 T |
|
安全无毒核酸染料 |
YeaRed Nucleic Acid Gel Stain(10,000× in Water) |
500 μL |
|
常规条带分离 |
Agarose琼脂糖 |
100 g |