一步法共转录加帽试剂盒助力mRNA研究高效快速反应！
mRNA药物开发的整个流程大致可以分为几步：
序列确定&设计—mRNA体外转录—包封制备
mRNA体外转录（In Vitro Transcription, IVT）步骤：
质粒DNA 提取&线性化—体外转录（共转录加帽）—纯化—mRNA原液
目前现有的工艺大都是质粒DNA在酶切后进行一步纯化，在进行IVT步骤。
翌圣生物基于成熟的mRNA 应用开发中心，开发的：”Onepot mRNA Transcription“工艺，搭配翌圣生物的共转录试剂盒10673（T7 High Yield RNA Synthesis Kit for Co-transcription），可以得到高质量的mRNA原液产品。整个工艺在确保产品和工艺质量的前提下，减短了现有工艺的时长。
T7 High Yield RNA Synthesis Kit for Co-transcription 进行了共转录加帽的反应体系进行了优化，试剂盒使用 T7 RNA 聚合酶并以含有 T7 启动子序列的线型双链 DNA 为模板，以 NTPs和帽子类似物为底物，对启动子下游的 DNA 序列进行转录，高效合成单链 RNA。本试剂盒可以合成长转录本以及短转录本，以 1 μg 的模板投入量可以产生 100-200 μg 的 RNA，转录合成的 RNA。
-
相对酶法加帽，共转录加帽操作更简单，引入的物质更少；
-
操作便捷、减少工艺复杂度；
-
1 µg模板，可产生150-200 µg的Cap 1 mRNA
-
试剂盒采用修饰的N1-Me-pUTP和GAG(3’OMe)m7(3’OMeG)(5’)ppp(5’)(2’OMeA)pG，可减少自身免疫反应；
-
加帽效率高达95%以上；
-
试剂盒组分丰富，包含有NTPs，T7酶mix，帽类似物，DNase I 和LiCl等，满足一步法共转录所需试剂需求。
分别使用了2K 、4K的片段，20ul反应体系，1μg的质粒投入，参考说明书进行操作，可以产生150-200μg的mRNA。
采用CE的方法分别对2K、4K 的片段，进行完整度检测，完整度>92%。
使用LC-MS对2K的序列进行加帽率检测，加帽率为99.5%。
上图：HPLC 紫外色谱图
下图：解卷积分子量图谱
|
产品名称 |
货号 |
规格 |
|
T7 High Yield RNA Synthesis Kit for Co-transcription |
10673ES50/60/70 |
50T/100T/500T |
