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Exonuclease I:特异性去除单链DNA,PCR引物去除的最佳选择

注:如果您是想查询核酸外切酶ⅢExonuclease III),可点击链接获取产品应用详情或通过下方链接直接订购(https://www.yeasen.com/products/detail/4846)。

 

 

Exonuclease I 是什么?

核酸外切酶I(Exonuclease I)是一种对变性或单链脱氧核糖核酸具有高度选择性的核酸外切酶,作用时,Exonuclease I从单链聚脱氧核糖核苷酸的3 羟基端开始攻击,随后逐步释放出脱氧核糖核苷5 ' -单磷酸盐,但末端二核苷酸会保持完整,对双链DNA或RNA无活性。

 

图1. Exonuclease I降解单链DNA示意图

 

Exonuclease I 的作用

1.常用于在Sanger测序或SNP分析之前去除PCR反应中的单链引物(了解详情);

2.去除巢式PCR中的单链引物;

3.PCR产物酶法纯化(了解详情);

4.从核酸混合物中去除含有3'羟基末端的单链DNA等

 

 

翌圣Exonuclease I产品介绍

翌圣的Exonuclease I(Cat#14535ES)由分子酶改造平台——ZymeEditor™重组表达而来,可高效消化单链DNA,严格质控,无核酸外切酶(双链)、核酸内切酶、RNase残留,酶性能稳定,效期长达2年,只需80℃处理15 min即可使酶失活,简化了您的实验流程,适用于各种PCR反应后引物的去除及从核酸混合物中去除含有3'羟基末端的单链DNA。

 

01

单链DNA消化能力与品牌N*一致

20 μL反应体系中加入终浓度为15 pmol/μL的单链DNA底物,分别使用不同投入量(0.63、1.25、2.5、5、10、20 U)的翌圣及品牌N*的Exonuclease I在37℃下孵育15 min,80℃热失活15 min,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测单链DNA降解情况。结果显示翌圣的Exonuclease I消化单链DNA的能力与品牌N*一致。

 

图2. 翌圣及品牌N*对单链DNA的消化能力

 

02

无核酸内切酶残留

将500 ng底物DNA与100 U的Exonuclease I在37℃下孵育4 h,琼脂糖凝胶电泳检测DNA条带不发生变化,表明Exonuclease I无核酸内切酶残留。

 

图3. 核酸内切酶残留检测

 

03

无RNase残留

将底物RNA与20 U的Exonuclease I在37℃下孵育4 h,琼脂糖凝胶电泳检测RNA条带不发生变化,表明Exonuclease I无RNase残留。

 

图4. RNase残留检测

 

产品推荐

定位

产品名称

产品货号

PCR产物纯化(核酸外切酶I+碱性磷酸酶)

 

 

Exonuclease I (20 U/μL)

14535ES

Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP)

10322ES

高保真PCR预混液

2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye)

10164ES

琼脂糖

Agarose

10208ES

核酸染料

YeaRed Nucleic Acid Gel Stain(10,000× in Water)

10202ES

DNA Marker

GoldBand系列marker

10501ES-10518ES

RPA扩增中荧光探针的降解、单链特异性探针的制备、制备用于双脱氧测序的单链底物

核酸外切酶-Exonuclease III

14525ES

 

400-6111-883