RNase抑制剂(RNase inhibitor,简称RNasin)能够特异地与RNase以非共价键结合形成复合体,造成RNase失活,从而保护RNA的完整度,广泛应用于RT-qPCR、mNGS、tNGS等病原检测方法中。在病原体检测过程中,分子酶的背景菌残留需严格控制,若分子酶存在背景菌的干扰,则可能会淹没低丰度的靶标核酸或和靶标核酸一起被检出,从而影响结果的判读。
翌圣生物UCF.ME® Murine RNase Inhibitor (Cat#14672ES/14673ES/14674ES) 是以可溶形式在大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源RNase抑制剂,能够广泛抑制各种类型RNase (RNase A, B, C)。经RT-PCR、RT-qPCR检验,本产品能与常规逆转录酶及各种DNA Polymerase兼容。与人源RNase inhibitor相比,本产品不含人源蛋白中的两个对氧化非常敏感的半胱氨酸,因而具有更高的抗氧化活性。同时,更加适合于对高DTT敏感性实验,如qPCR等。
此外,与常规RNase inhibitor(Cat#10603ES/10610ES/14671ES)相比,UCF.ME® Murine RNase Inhibitor 的宿主基因组DNA残留水平更低,助力解决病原检测中的背景菌干扰,提高检测准确度。
图1. UCF.ME® Murine RNase Inhibitor核酸外切酶、切口酶残留及RNase残留检测。
注:N代表阴性对照;1、2、3代表3批次UCF.ME® Murine RNase Inhibitor
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E.coli基因组DNA残留< 0.1 copies/100 U,显著低于常规版本
对不同批次的UCF.ME® Murine RNase Inhibitor进行宿主(E.coli)基因组DNA残留检测,并与常规Murine RNase inhibitor的宿主残留水平对比,结果显示UCF.ME® Murine RNase Inhibitor宿主基因组DNA残留低于0.1 copies/100 U,显著低于常规版本。
图2.UCF.ME® MRI与常规版MRI中E.coli基因组残留检测结果对比
以Total RNA为模板,使用Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)(Cat#13650ES)进行RT-qPCR反应,验证UCF.ME® Murine RNase Inhibitor消化RNaseA能力,结果表明翌圣UCF.ME® MRI对RNaseA的抑制能力显著优于同类国际竞品。
图3.UCF.ME® MRI对RNase抑制能力验证
注:Yeasen UCF MRI:8 U UCF.ME® MRI+80 ng RNaseA;Yeasen MRI:8 U MRI+80 ng RNaseA;竞品N*:8 U同类竞品+80 ng RNaseA;Control:无MRI及RNaseA
为更好地解决病原检测中的背景菌干扰问题,翌圣生物特别推出超低残留分子酶定制化生产服务,可根据客户需求进行酶类、核酸残留水平、规格等多参数定制化生产。如需了解更多信息,可拨打400-6111-883热线或与业务员联系。