NADH(还原性辅酶I)是NAD的还原态。在氧化还原反应中,NADH作为氢和电子的供体,NAD作为氢和电子的受体,参与多种生理过程,一般与糖酵解和氧化磷酸化有关。NAD与一个磷酸分子以酯键结合形成NADP,NADP作为氧化剂参与光合作用。还原性辅酶II (NADPH)是NADP接受电子后的产物。NADPH作为供氢体可参与体内多种代谢反应,与大分子的生物合成有关,如:脂肪酸和核酸的合成。
图1.NAD(P)+与NAD(P)H之间的转化(PMID: 31376683)
NAD/NADP(尼古丁酰胺腺嘌呤二核苷酸)和NADH/NADPH(还原型尼古丁酰胺腺嘌呤二核苷酸)是细胞内常见的辅因子,参与多种生物化学反应,包括代谢、氧化应激和信号传导等。在能量代谢过程中,NAD和NADH相互转换,NADP和NADPH相互转换,它们之间的比例对于细胞内氧化还原状态的平衡具有重要影响。通常情况下,正常细胞内NAD/NADH比例为约10-700 :1,NADP/NADPH比例为大约0.1-0.5 :1。这一比例可通过荧光显微镜或酶促反应体系等方法进行测定,进而评估细胞内氧化还原状态及相关代谢途径的活性。
正常生物体内NAD/NADH和NADP/NADPH比率始终处于一个动态平衡的状态,是可以反映出细胞的氧化还原状态的非常重要的指标。
50140 NADP/NADPH比率荧光检测试剂盒(红色荧光)
NAD(P)H可以将试剂盒中探针还原为高荧光产物,其信号可以通过荧光酶标仪(Ex/Em = 540/590 nm)或在比色测定(OD =576 nm)中定量,适用于多种样本。
图2.NADH标准曲线
加入75 μL NAD/NADH反应液后室温避光孵育30 min后,荧光酶标仪下测量荧光读值
图3.NADPH标准曲线
加入75 μL NADP/NADPH反应液后室温避光孵育30 min后,荧光酶标仪下测量荧光读值。
产品名称 |
产品货号 |
规格 |
NAD/NADH Ratio Fluorimetric Detection Assay Kit (Red Fluorescence) |
50130ES |
250 T |
NADP/NADPH Ratio Fluorimetric Detection Assay Kit (Red Fluorescence) |
50140ES |
250T |
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[1] Fukuzumi S, et al. Catalytic recycling of NAD(P)H. J Inorg Biochem. 2019 Oct;199:110777.