1970年Mandel和Hige发现大肠杆菌细胞经CaCl2溶液处理时能够吸收λ噬菌体DNA,细胞这种能够吸收DNA的状态称感受态。使用理化方法诱导细胞,改变细胞膜状态,增强细胞膜的通透性,细胞膜表面性状发生暂时性改变,方便外源基因或者载体进入受体细胞,这种处于最适摄取和容纳外来DNA状态的细胞称为感受态细胞 (competent cell)。感受态细胞是基因克隆和蛋白表达所必备的工具。传统的感受态,转化效率低,转化时间长。翌圣新款感受态,更快速、更高效。
快速转化与常规转化有什么不同?
翌圣快速感受态细胞效率如何?
翌圣快速感受态细胞实验推荐?
1.快速转化与常规转化有什么不同?
快速转化(10 min)操作流程:
快速热激转化(25 min)操作流程:
常规转化操作流程:
2.翌圣快速感受态细胞效率如何?
从产品数据大家可以看到,我们的新款快速感受态,加速不减效。小翌全新上线快速感受态助您在克隆的路上“快人一步”。
图1. F -DH5α 质粒转化平板
A:pFast质粒10 min快速转化平板(A-1/A-2为两个重复);B:pFast质粒25 min快速转化平板(B-1/B-2为两个重复);C:pFast质粒常规转化平板(C-1/C-2为两个重复)。
A:酶连产物10 min快速转化平板(A-1/A-2为两个重复);B:酶连产物25 min快速转化平板(B-1/B-2为两个重复);C:酶连产物常规转化平板(C-1/C-2为两个重复)。
3.翌圣快速感受态细胞实验推荐?
快速感受态既可以适应快速程序又可以适应常规程序,那么在实际操作时,我们该选用什么程序呢?
一般情况下,快速感受态细胞既可以快速转化也可以常规热激转化,对于>7kb质粒构建,为提高转化效率,可采用常规转化方式进行转化。
快速感受态细胞涂氨苄/羧苄青霉素抗性平板时效率较高,若涂卡那霉素或其他抗生素平板,转化效率会有所下降,因为在不加入孵育步骤的条件下,卡那霉素对于菌体的毒性较大。若要提高卡那霉素或其他抗性质粒的转化效率,可增加孵育步骤,即选用25 min转化步骤或常规转化步骤。
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名称 |
货号 |
应用场景 |
TOP10 Chemically Competent Cell TOP10化学感受态细胞 |
11801ES |
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BL21(DE3) Chemically Competent Cell BL21(DE3)化学感受态细胞 |
11804ES |
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10911ES |
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10922ES |
单/多片段快速克隆、定向克隆 |
|
10907ES |
基因测序、复制与保存 |
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Hieff Clone® Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted 零背景TOPO-TA克隆试剂盒(不含MCS多克隆酶切位点) |
10908ES |
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Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Cloning Kit 零背景TOPO-Blunt平末端克隆试剂盒 |
10909ES |
基因测序、复制与保存 |
Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Simple Cloning Kit 零背景TOPO-Blunt平末端克隆试剂盒(不含MCS多克隆酶切位点) |
10910ES |
亚克隆 |
10102ES |
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10157ES |
各种目的基因快速扩增,同时可用于菌液、酵母简单裂解后直扩 |
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