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耐dUTP高保真酶,助力DNA甲基化测序

DNA聚合酶是PCR反应的核心组分,广泛应用于生物及医学研究等领域。对于普通PCR,常规热稳定DNA聚合酶(如Taq DNA聚合酶)即可满足需求。但对于高通量测序,扩增产物的准确性非常关键,优选高保真酶进行扩增。

 

DNA甲基化测序是研究生物体内基因调控的重要技术手段,越来越多地应用于肿瘤早筛、诊断等技术中。全基因组重亚硫酸氢盐测序(WGBS)是甲基化检测的金标准,在WGBS文库构建过程中,样本DNA经重亚硫酸氢盐处理后,非甲基化的胞嘧啶(C)会转化为尿嘧啶(U),甲基化的C则保持不变。在后续PCR扩增中U会转变为胸腺嘧啶(T),但常规高保真酶不能以含有dUTP的DNA作为扩增模板,因此需要经过特殊改造耐受dUTP,从而应用到甲基化文库构建或者定点突变等技术中。
 
图1. WGBS建库的两种技术路线[1]
 

 

Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase是翌圣经过定向改造,针对含尿嘧啶(U)模板推出的一款高保真DNA聚合酶,具备优良的扩增性能。产品本身不仅具备高扩增效率、高灵敏度和高特异性,而且酶本身各项残留均很低,满足各种模板类型的扩增需求。

 

性能展示

01 高扩增产量:与进口品牌K*产量相当

 图3. A:分别使用翌圣Yeasen(橙)、和品牌K*(蓝)、N*(绿)、V*(灰)在100ng Bisulfite 处理后DNA起始量实验条件下建库,建库纯化后文库产量高于其它品牌。    
      
B: 分别使用翌圣Yeasen(橙)、和品牌K*(蓝)、N*(绿)、V*(灰)在100ng λDNA起始量实验条件下建库,建库纯化后文库产量与品牌K*相当,高于品牌N*以及V*。

 

02 无切口酶残留

 
图4. 切口酶残留结果:跑胶结果显示Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase与阴性对照(C)一致,无切口酶残留。

 

 

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dUTP扩增酶

Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase (1 U/μL)

10145ES

高浓度耐dUTP扩增酶

Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase (3 U/μL)

Hieff Canace® U+高保真DNA聚合酶 (3 U/μL)

14384ES

高效率TdT末端转移酶(带buffer

Terminal Deoxynucleotidyl Transferase

TdT末端转移酶

10302ES

高效率TdT末端转移酶(不含buffer

Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (20U/μL, without buffer)

TdT 末端转移酶

14456ES

高效率连接酶

E. coliDNA ligase (60 U/μL)

14955ES

DNA纯化/分选磁珠

Hieff NGS® DNA Selection Beads

12601ES

文库定量试剂盒

dsDNA HS Assay Kit

12640ES

甲基化建库试剂盒

Hieff NGS® Methyl-seq DNA library Prep kit for Illumina

甲基化DNA建库试剂盒

12211ES

400-6111-883