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RPA等温扩增│Bsu DNA polymerase (Large fragment)

 

重组酶聚合酶扩增RPA是一种近年来发展起来的等温扩增技术，具有反应灵敏度高、特异性强、对仪器依赖程度低且检测时间短等优点，特别适用于基层和现场即时检测。
 

RPA等温扩增技术简介

RPA技术的原理是重组酶蛋白与引物（A）形成复合物，能在双链DNA中寻找同源序列（B）。然后通过重组酶（C）的链置换活性将引物插入同源位点，并且单链结合蛋白稳定置换DNA链（D）。随后重组酶被分解，使得引物的3'末端被链置换并与Bsu DNA polymerase (Large fragment) 结合（E），使其延长引物（F），通过循环重复该过程对模板上的目标区域进行指数式扩增。

 

该技术可用于不同种类的目标生物检测，样本耐受性高，可广泛覆盖疫病防控、医学诊断、食品安全、环境卫生、农业病害、动物健康、生物制品质控等应用领域。
图1.RPA等温扩增技术原理图[1]
 

 

Bsu DNA polymerase (Large fragment)是RPA等温扩增的核心酶，具有较强的链置换活性和聚合酶活性，能在恒温条件（37~42℃）下快速、高效、特异性的扩增模板，在10~30 min内即可将痕量的核酸模板（低至单拷贝）扩增至可以检出的水平。

 

 

翌圣Bsu DNA polymerase (Large fragment)

翌圣生物Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL) （Cat#11078ES）来源于嗜热脂肪芽孢杆菌，该酶保留了Bsu DNA polymeras I的5´-3´聚合酶活性，但缺失了5´-3´核酸外切酶结构域，具备纯度高、残留控制严格、单次产能高，可确保批间稳定性的产品优势，可广泛应用于基于等温扩增RPA技术的病原体即时检测。

 

性能展示

1. 无核酸外切酶、切口酶及RNase残留
图2. Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL) 核酸外切酶、切口酶残留检测。
注：C代表阴性对照；1、2代表不同批次Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL)
图3. Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL) RNase残留检测。
注：C代表阴性对照；1、2代表不同批次Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL)

 

2. 高效链置换活性，构建RPA扩增体系灵敏度低至10 copies/T

图4. 用翌圣Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL)进行RT-RPA反应，扩增RNA病毒，灵敏度低至10 copies/T。

 

选择指南

产品定位

产品名称

产品货号

RPA相关酶原料

Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL)

11078ES

T4 UvsX Recombinase(2 μg/μL)

11079ES

T4 UvsY protein (2 μg/μL)

11080ES

T4 gene 32 protein (gp 32) T4噬菌体基因32编码蛋白

11081ES

肌酸激酶Creatine Kinase (2 μg/μL)

14502ES

高灵敏度Bst酶

Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)

14402ES

Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (2,000 U/μL)

14403ES

无甘油Bst酶

Lyophilized Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL，Glycerol-Free)

14405ES

适合RT-Lamp的逆转录酶

Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase 第三代耐热逆转录酶

11111ES

第五代耐热逆转录酶Hifair® V Reverse Transcriptase(1000 U/μL)

14603ES

Hifair® III Reverse Transcriptase,600U/μL,Glycerol-free 第三代耐热逆转录酶(无甘油版)

11297ES

鼠源RNase抑制剂

Murine RNase Inhibitor(40 U/µL) 鼠源RNase抑制剂

10603ES

鼠源RNase抑制剂 Murine RNase Inhibitor(200 U/µL)

10610ES

鼠源RNase抑制剂 Murine RNase Inhibitor(300 U/µL)

14671ES

Murine RNase Inhibitor(200 U/µL,Glycerol-free)

10703ES

防污染UDG酶

Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), 1 U/μL

14455ES

染料法RT-Lamp显示试剂盒

RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)

13762ES

pH敏感染料法RT-Lamp显示试剂盒（可冻干）

RT-LAMP pH Sensitive Dye Chromogenic Version Freeze-Dryable Kit

13920ES
 
参考文献
[1] 施奕,徐昌平,余蓓蓓,卢亦愚,梅玲玲.重组酶聚合酶扩增技术研究进展[J].病毒学报, 2020,36(03):522-532.
[2] Zhao Y, Chen F, Li Q, Wang L, Fan C. Isothermal Amplification of Nucleic Acids. Chem Rev. 2015 Nov 25;115(22):12491-545. doi: 10.1021/acs.chemrev.5b00428. Epub 2015 Nov 9. PMID: 26551336.

 

400-6111-883