PCR技术已经成为生物学实验室的常备技能,荧光定量,基因测序等大家耳熟能详的技术也和PCR息息相关。微量的DNA模板在DNA聚合酶、引物的作用下,以dNTP为原料,经过数十次的热循环过程便可实现指数级的增长,耗时大约1-2小时。一个保真性好的DNA聚合酶对于这种精细又快速的实验至关重要。
那么聚合酶保真度是指什么呢?
DNA聚合酶的保真度是指准确复制目的模板的结果。具体涉及到多个步骤,包括读取模板链,选择正确的三磷酸核苷。为了高效区分正确和错误的核苷酸,一些DNA聚合酶具有3’到5’核酸外切酶活性。这种“校正”活性可切除不正确掺入的单核苷酸,并将其替换成正确的核苷酸。高保真PCR使用掺入错误率低且具有校正活性的DNA聚合酶,以保证目的DNA的忠实复制。
这样的反应在分子实验室几乎每天都在进行着。随着技术的不断更新,大家对产品的要求也在不断提高,为此,翌圣新开发了具有高保真性、高成功率、高特异性的Hieff Canace® 超高保真酶,立志为科研事业贡献一己之力!
Hieff Canace® Plus高保真酶六大特点
超高保真:保真性是Taq酶的83倍。
特异性强:热启动DNA聚合酶提高反应的特异性,扩增目的条带单一。
扩增速度快:极限扩增速度10 sec/kb,30 sec/kb可高效扩增绝大多数片段。
灵敏度高:可扩增低至1 pg模板。
稳定性好:37°C保存7 d,反复冻融50次,不影响产品性能。
操作方便:即用型预混液,室温加样,操作简便,保证了更好的重复性与准确性。
超高保真性
图1. 10154具有超高保真性,保真性是Taq酶的83倍。用10154和Taq酶同时进行扩增反应,对其产物(约250000个碱基)进行测序,10154ES仅有6个碱基发生错配,Taq酶错配碱基数为609个。10154ES超高的保真性对于要求保真性的克隆等可以放心进行PCR扩增。
特异性强
图2. 枯草芽孢杆菌gDNA 1kb片段扩增。T:市场某品牌,10154:Yeasen高保真酶。目的条带单一,产量高。M:100 bp DNA Marker(10507ES),模板投入量50 ng,体系50μL。
扩增速度快
图3. Hieff Canace® Plus高保真酶分别扩增水稻gDNA 2 kb片段和小鼠gDNA 4 kb片段。以不同速度进行扩增,结果显示,10154ES 10k/kb扩增速度下,能得到目的条带。M:1 kb DNA Marker(10510ES)。
灵敏度高
图4. Hieff Canace® Plus高保真酶扩增质粒500 bp片段,不同模板量(1 pg-0.5 μg)均可有效扩增,灵敏度低至1 pg。NC:阴性对照。M:100 bp DNA Marker(10507ES)。
稳定性好
图5. Hieff Canace® Plus稳定性好,试剂于-80℃、-20℃、4℃、37℃分别放置1 d、7 d,扩增小鼠gDNA 4 kb片段,Marker为Yeasen 1 kb DNA ladder (Cat#10510)。结果显示,性能未受到影响。
图6. Hieff Canace® Plus稳定性好,扩增小鼠gDNA 4 kb片段。1/2/3/4分别表示30/40/50/60%GC含量的基因,反复冻融50次,不影响产品性能。Marker为Yeasen 1 kb DNA ladder (Cat#10510)。
翌圣高保真酶以其超高的保真性、极佳的特异性以及超强的稳定性广受消费者青睐。除了高品质的高保真酶,翌圣也具有一系列完整的分子克隆解决方案。选择翌圣,必定给你带来不一样的惊喜!
选品指南
产品定位 |
产品名称 |
产品货号 |
规格 |
高保真PCR Mix,可用于片段扩增、基因克隆 |
10154ES |
100 μL |
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1mL |
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5×1 mL |
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长片段扩增、基因克隆 |
10158ES |
1 mL |
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5×1 mL |
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50×1 mL |
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长片段扩增、基因克隆 |
10159ES |
1 mL |
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5×1 mL |
|||
50×1 mL |
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单片段连接,可用于转基因载体构建 |
10911ES |
20T |
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多片段连接,可用于转基因载体构建 |
10922ES |
20T |
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适用于带A尾的产物;用于靶基因测序、复制与保存 |
10907ES |
20T |
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适用于带A尾的产物;用于亚克隆 |
10908ES |
20T |
|
适用于平末端的产物;用于靶基因测序、复制与保存 |
10909ES |
20T |
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适用于平末端的产物;用于亚克隆 |
10910ES |
20T |
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感受态细胞、可用于DNA克隆和质粒扩增 |
11803ES |
10×100 μL |
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感受态细胞、可用于DNA克隆和质粒扩增 |
11802ES |
10×100 μL |
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蛋白表达 |
11804ES |
10×100 μL |
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感受态细胞、可用于DNA克隆 |
11801ES |
10×100 μL |
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100×100 μL |
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