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新品上市 | Tth DNA聚合酶——聚合酶中的多面手

对于RNA样本检测，一般需要使用逆转录酶将RNA逆转录为cDNA，再通过DNA聚合酶进行PCR扩增，整个反应过程需要双酶协同工作，对于体系优化具有一定挑战。针对分子诊断试剂厂家使用痛点，翌圣生物推出一款兼具逆转录酶活性和DNA聚合酶活性的高品质Tth DNA聚合酶。

 

Tth DNA聚合酶是一种从嗜热菌Thermus thermophilus HB8中发现的耐热DNA聚合酶，在Mg2+存在的条件下，该酶具有5′-3′ DNA聚合酶活性和5′-3′ 核酸外切酶活性，无3′-5′ 核酸外切酶活性，可广泛用于PCR扩增反应。在Mn2+存在的条件下，该酶在55-70℃条件下表现出较强的逆转录活性，可兼容复杂模板，且没有RNase H活性，在一步法RT-PCR反应中表现出卓越的性能。

 

产品特点

  • 蛋白纯度（SDS-PAGE）≥95%；

  • 无核酸外切酶、DNase、RNase残留；

  • 热稳定性高达95℃；

  • PCR扩增检测灵敏度可达100 pg。

 

性能展示

无核酸外切酶残留

图1.核酸外切酶残留检测：将10 U 翌圣Tth DNA聚合酶加入到 0.5 μg λDNA- Hind Ⅲ digest中，于37℃孵育4小时，之后进行琼脂糖凝胶电泳 ，结果显示DNA 条带未发生变化，说明翌圣Tth DNA聚合酶（Cat#14607ES）产品无核酸外切酶残留。

 

无DNase残留

图2.DNase残留检测：将10 U 翌圣Tth DNA聚合酶分别加入到 0.5 μg λDNA中，于37℃孵育16小时，之后进行琼脂糖凝胶电泳 ，结果显示DNA 条带未发生变化，说明翌圣Tth DNA聚合酶（Cat#14607ES）产品无DNase残留。

 

无RNase残留

图3.RNase残留检测：将10 U Tth DNA聚合酶分别加入到 0.5 μg 293T RNA中，于37℃孵育2小时，之后进行琼脂糖凝胶电泳 ，结果显示RNA 条带未发生变化，说明翌圣Tth DNA聚合酶（Cat#14607ES）产品无RNase残留。

 

热稳定性高达95℃

图4.翌圣Tth DNA聚合酶（Cat#14607ES）产品热稳定性测试：将Tth DNA聚合酶分别置于45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、75℃、80℃、85℃、90℃、95℃热处理15分钟后进行RT-qPCR实验，结果显示热处理后Tth DNA聚合酶（Cat#14607ES）产品与未处理组性能保持一致，说明翌圣Tth DNA聚合酶（Cat#14607ES）产品热稳定性高达95℃。

 

PCR扩增检测灵敏度可达100 pg

图5.翌圣Tth DNA聚合酶（Cat#14607ES）产品PCR扩增灵敏度检测：以293 gDNA为模板，对human GAPDH基因进行检测，结果显示其PCR扩增检测灵敏度可达100 pg。
 

 

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400-6111-883