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mRNA全新转录Buffer&核苷酸助力IVT性能提升

mRNA理论上可以表达任何蛋白质，被称为“万能钥匙”，因此 mRNA技术在生物制药领域极具潜力和热度。在mRNA生产流程中，通过体外转录（In Vitro Transcription，IVT）以线性DNA为模板来制备mRNA，是mRNA工艺中的重要一环。体外转录合成（IVT）的过程需要多个酶和核苷酸等物质的参与，是一个较为复杂的酶催化反应，为了保证IVT的工艺稳定，通常需要根据工艺的规模设计不同反应体系以达到最优条件来实现产能的稳步提升。

 

相关研究发现，通过不同类型的修饰核苷酸替换和适当的镁离子浓度，能抑制dsRNA的合成[1]，镁、钠离子，游离核苷酸NTPs以及不同类型的离子对于IVT反应saRNA产量也有一定的影响[2]。另外，离子类型对于IVT反应产量具有非常重要的作用[3]。因此，为了获得更优的IVT反应体系，翌圣生物摸索了多种反应条件和体系，来提升IVT产物性能，不仅可以一定程度地提高产量，同时降低dsRNA的产生以及提高RNA的完整度。现推出全新的10×Transcription Buffer，同时搭配性能优越的Tris盐型核苷酸产品，助力mRNA药物快速开发。
 

产品信息

产品编号

产品名称

10670ES

10×Transcription Buffer 2 GMP-grade

10652ES

ATP Tris Solution GMP-grade (100 mM)

10653ES

CTP Tris Solution GMP-grade (100 mM)

10654ES

UTP Tris Solution GMP-grade (100 mM)

10655ES

GTP Tris Solution GMP-grade (100 mM)
 
 

产品优势

1. 提高IVT产量

 

图1. 不同镁离子盐型对IVT产量影响

 

图2.不同NTP盐型对IVT产量影响

 

  • 经优化的TranscriptionBuffer（10670ES）能提升IVT产量
  • 经优化的Transcription Buffer（10670ES）搭配Tris-NTP能显著提升IVT产量
 

2. 抑制dsRNA合成

同等条件下，分别使用Tris盐和Na盐的NTP进行IVT 反应，采用Dot blot 的方法对dsRNA 进行检测。

 

 
图3.不同盐型NTP对IVT副产物dsRNA的影响
 

  • Tris-NTP制备的RNA中dsRNA含量明显降低。

产品特色

  • 符合ISO 13485体系

  • 通过产品稳定性验证

  • 符合GMP指南

  • AOF生产过程和原料(TSE & BSE)

  • 大规模生产能力

  •  

产品信息

 

产品编号

产品名称

包装

10670ES

10×Transcription Buffer 2 GMP-grade

1/10/25/500mL

10671ES

T7 RNA Polymerase Mix GMP-grade

40/400µL，10/400 mL

10624ES

T7 RNA Polymerase GMP-grade (50 U/μL)

5000/50000U

10625ES

T7 RNA Polymerase GMP-grade (250 U/μL)

10/100/2500KU，100 MU

10652ES

ATP Tris Solution GMP-grade (100 mM)

1/5/25/500mL

10653ES

CTP Tris Solution GMP-grade (100 mM)

1/5/25/500mL

10654ES

UTP Tris Solution GMP-grade (100 mM)

1/5/25/500mL

10655ES

GTP Tris Solution GMP-grade (100 mM)

1/5/25/500mL

10656ES

Pseudo UTP Tris Solution GMP-grade (100 mM)

20/100μL，1/5mL

10657ES

N1-Me-Pseudo UTP Tris Solution GMP-grade (100 mM)

20/100μL，1/5/25/500mL
点击产品名称查看详情
 
[1].Triana-Alonso,F.J., Dabrowski,M., Wadzack,J. and Nierhaus,K.H. (1995) Self-coded 3'-extension of run-off transcripts produces aberrant products during in vitro transcription with T7 RNA polymerase. J. Biol. Chem., 270, 6298–6307
[2].Konarska,M.M. and Sharp,P.A. (1989) Replication of RNA by the DNA-dependent RNA polymerase of phage T7. Cell, 57, 423–431.
[3]Samnuan K , Blakney A K , Mckay P F , et al. Design-of-Experiments In Vitro Transcription Yield Optimization of Self-Amplifying RNA. 2021.

 

400-6111-883