Yeasen高性能PCR定量试剂为您加油！让您的实验数据赢在起跑线上
Hieff qPCR SYBR Green Master Mix是2×实时定量PCR扩增的预混合溶液。Mix中含有热启动Hieff Taq DNA Polymerase、SYBR Green I、dNTPs、Mg2+。预混ROX。使用时，仅需在扩增体系中加入模板和引物即可进行实时荧光定量PCR，大大简化操作过程，降低污染几率。
操作方便 —— 预混ROX。
精准性好，线性检测范围广 —— 配体法热启动酶随温度变化实时调节DNA聚合酶活性。
重复性高 —— 双阳离子缓冲液保证热启动酶活稳定。
扩增性能优良 —— 缓冲液中含有PCR增强剂。
特异性高 —— 添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子。
Hieff qPCR Mix 的优势所在！
1. 线性检测范围广
图1. 以质粒DNA（106-101 拷贝/ul）为模板，10倍梯度稀释，扩增拟南芥Actin基因。
结果显示Hieff qPCR SYBR Green Master Mix可在宽广的定量区域内获得良好的线性关系，扩增效率高，扩增高度特异，线性关系良好。
2. 精准性好
图2. 以人293T细胞cDNA为模板，经不同倍数的梯度（5倍或2倍）稀释，扩增Actin基因。
Hieff qPCR SYBR Green Master Mix可精确分辨5倍，甚至低至2倍的模板量差异。而且在宽广的定量区域内表现良好。
3. 重复性高
图3. 以人293T细胞cDNA为模板，使用Hieff qPCR SYBR Green Master Mix进行90孔平行重复实验扩增人Actin基因，本产品表现出极好的扩增重复性。
4. 扩增性能优良
图4. 以10倍梯度稀释的人293T细胞cDNA为模板，扩增Actin基因，与同类产品相比，Hieff qPCR SYBR Green Master Mix扩增荧光信号更强，灵敏度更高，且复孔重复性更好。
5. 特异性高
图5. 以人293T细胞cDNA为模板，扩增6个不同基因。相较于其他品牌同类产品，Hieff qPCR SYBR Green Master Mix扩增目的片段单一，熔解曲线表现出更少的非特异扩增峰及引物二聚体峰。
客户体验专区之样本数据
客户单位：上海交通大学
产品名称：Hieff qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox Plus)（Cat. NO. 11202）
仪器型号：ABI 7500
实验设计：材料：人293T细胞。反转录RNA起始量：2 μg。cDNA稀释倍数：2倍。定量体系：20 μl。检测基因：Actin、FN。
结果分析：较其他品牌同类产品，翌圣特异性更好，Ct值整体低1-2，且重复性较好。
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客户单位：清华大学医学院
产品名称：Hieff qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox Plus)（Cat. NO. 11203）
仪器型号：ABI Step One Plus
实验设计：材料：小鼠腹腔巨噬细胞。反转录RNA起始量：1 μg。cDNA稀释倍数：20倍。定量体系：20 μl。检测基因：STAT1。
结果分析：两家产品熔解曲线均为单一峰，与其他品牌同类产品相比，翌圣Ct值更小，扩增效率较高。
优越的品质，超低的价格（5ml=200次定量实验=498元）
试剂选择指南【参照仪器型号】
Cat. NO. 11201. Hieff qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) ：
Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Roche Applied Science: LightCycler480, LightCycler2.0; Lightcycler96;
Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR.
Cat. NO. 11202. Hieff qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox Plus) ：
Applied Biosystems: 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio Dx, QuantStudio 3and 5, QuantStudio 6,7,12k Flex;
Stratagene: MX3000P, MX3005P, MX4000P.
Cat. NO. 11203. Hieff qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox Plus) ：
Applied Biosystems: 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus.
产品信息
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产品名称 |
货号 |
规格 |
目录价（元） |
优惠价（元） |
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11201ES08 |
5ml |
740.00 |
498.00 |
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11202ES08 |
5ml |
740.00 |
498.00 |
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11203ES08 |
5ml |
740.00 |
498.00 |
FAQ
Q：溶解曲线出现双峰，应如何优化实验？
A：熔解曲线出现双峰，需要通过DNA琼脂糖凝胶电泳判断非目标峰是引物二聚体还是非特异性扩增。
如果是引物二聚体，建议降低引物浓度，或者重新设计扩增效率高的引物。
如果是非特异性扩增，请提高退火温度，或者重新设计更高特异性的引物。
Q：定量结果中，Ct值多大比较合适？
A：Ct 值落在 20-30 之间时，定量分析最准确；
Ct 值小于 10，需要将稀释模板后，重新进行实验；
Ct 值介于 30-35 之间，需要提高模板浓度，或者增大反应体系的体积，以提高扩增效率，保证结果分析的准确性；
Ct 值大于 35 时，检测结果无法定量分析基因的表达量，但可用于定性分析。
Q：如何提高实验重复性？
A：使用性能较好的移液枪；
qPCR mix使用前充分混匀；
定期校准仪器：定量PCR仪不同位置温度控制不一致；
模板浓度太低：模板浓度越稀，重复性越差，减少模板稀释度或提高加样体积；
大反应体系进行实验：将模板做高倍稀释，以大体积加入反应体系中；
将引物和qPCR Mix混合配成大体系，混匀：总体积对应的加样孔数要比计划的加样孔数多1-2个。
已发表文献（部分）
【1】Han X, Wang R. Mapping the Mouse Cell Atlas by Microwell-Seq. Cell. 2018 Feb 22;172(5):1091-1107.e17. doi: 10.1016/j.cell.2018.02.001. （浙江大学）（影响因子：30.410）
【2】Wang Y, Hu SB. Genome-wide screening of NEAT1 regulators reveals cross-regulation between paraspeckles and mitochondria. Nat Cell Biol. 2018 Oct;20(10):1145-1158. doi: 10.1038/s41556-018-0204-2. Epub 2018 Sep 24. （中科院细胞生化所）（影响因子：20.460）
【3】Wang J, Ge P. The mycobacterial phosphatase PtpA regulates the expression of host genes and promotes cell proliferation. Nat Commun. 2017 Aug 15;8(1):244. doi: 10.1038/s41467-017-00279-z.（中科院微生物所）（影响因子：12.353）
【4】Yafen Wang, Xiong Zhang. Bisulfite-free, single base-resolution analysis of 5-hydroxymethylcytosine in genomic DNA by chemical-mediated mismatch. Chem. Sci., 2019,10, 447-452 （武汉大学）（影响因子：8.757）
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