Taq酶是生命科学领域应用最广泛、使用频率最高也是最重要的工具，广泛应用于各个领域。提高PCR扩增特异性的方法有很多，最简单的方法就是采用热启动Taq酶。鉴于单克隆抗体与抗原结合的高亲和力特性，因此可以利用单克隆抗体封闭Taq酶的活性，提高PCR扩增的特异性和PCR产物的产量，增加长片段的检出率。

抗体法热启动的关键是Taq酶抗体，传统的Taq酶抗体主要有三大问题：其一，Taq酶抗体的封闭效率不高，封闭率通常只在90%左右；其二，Taq酶抗体种类少，缺乏3’-5’外切酶活封闭抗体，缺乏封闭Taq酶突变体的抗体；其三，成本高昂，缺乏规模化生产。

图1.传统Taq酶抗体存在的问题

为了解决这三大问题，翌圣生物加大研发投入，通过多年的积累，筛选到大量优质的抗体，构建了一个种类繁多的抗体库，不仅可以封闭野生型Taq酶，还能封闭Taq酶突变体，更具有3’-5’外切酶活性封闭抗体和双封闭抗体。客户仅需提供少量的Taq酶用以筛选，即可快速找到与之匹配的高封闭效率抗体，通过规模化的生产，快速生产大量抗体供客户使用，成本更低，时间更短！

抗体分单克隆抗体和多克隆抗体，单克隆抗体是只能与特定的、单一抗原结合的抗体，而多克隆抗体是能与一种以上抗原结合的抗体。因此，单克隆抗体特异性明显强于多克隆抗体。翌圣应用杂交瘤技术制备单克隆抗体，为了获得优质的Taq酶抗体，在研发过程中每一步都精益求精，从Taq酶的表达纯化开始，通过免疫小鼠、收集脾脏B细胞、体外融合细胞、杂交瘤细胞筛选、四次细胞亚克隆、注射杂交瘤细胞获得抗体，然后收集抗体，通过亲和层析纯化出抗体，最后对获得的抗体进行Taq聚合酶活性封闭性能筛选。

图2.Taq酶抗体开发流程

通过高通量的抗体封闭性能筛选，翌圣筛选到的双封闭抗体，不仅封闭效果好，对于不同类型的Taq酶，封闭率均超过95%；而且性能释放速度快，95℃热激20 s后，可以释放95%以上的酶活。

表1. 不同类型Taq酶的封闭效率

翌圣开发出优质的Taq酶单克隆抗体，实现了从μg到Kg级生产规模，有效降低了成本，同时也带了新的问题，那就是如何保证抗体质量？

为了实现抗体纯度高、批间可重复性强、杂质污染少，翌圣在生产过程中严格执行ISO13485:2016标准，稳定生产工艺，保证批次稳定性。同时加强质检，做到“三重防护”：中间原料质检、成品自检留样、成品抽检管控。除了常规浓度和纯度检测，还对包括核酸外切酶、切口酶、RNase等残留进行检测，确保无残留，从而不影响下游的实验，更进一步的是，翌圣还对Taq酶单克隆抗体的性能进行质检，保证封闭效率合格，阴性孔目的通道不起峰。

图3.翌圣双封闭抗体的特点

得益于翌圣对抗体质量的严格要求，经过测试发现，翌圣的Taq双封闭抗体能够有效提升试剂的性能。在ARMS-PCR扩增中分型准确，灵敏度更高；试剂37℃放置稳定性更高；能解决基线上漂问题，更有利于基线平稳。

图4.双封闭抗体提升试剂性能

翌圣大批量生产的高品质Taq酶抗体，能够有效提高热启动聚合酶的性能，减低成本，丰富的抗体库为各种Taq酶突变体提供了高封闭效率抗体，充分满足客户的各种需求。