疏水层析的原理

       疏水层析是根据物质的疏水性质进行分离的技术。蛋白疏水性取决于表面的氨基酸残基带的疏水基团多少和强弱。

       除了通过蛋白质的结构来预测蛋白的疏水性以外，我们还可根据蛋白开始盐析沉淀的盐浓度为基础来评价蛋白的相对疏水性。

       图1是用四种标准蛋白质在琼脂糖苯基高分辨率介质上的层析图谱应用举例。与几乎所有的色谱图一样，左侧的垂直轴显示的是UV吸收值，通过盐浓度的变化可以实现四种蛋白的完全分离，如果考虑它们的三级结构，我们会发现疏水性弱的蛋白质会最后被洗脱下来。 

图1.图片来源于网络

 

疏水层析的影响因素

 

产品简介

 

产品应用

 

纯化步骤

 

测试结果

填料：5mL翌圣Butyl Agarose 4FF&其它品牌对应产品样品：发酵液上清进行SP强阳离子交换柱纯化后样品加入1.5M硫酸铵，pH3.5
样品加载：20mL
起始缓冲液A：20mM醋酸钠+1.5M硫酸铵 PH3.5
洗脱缓冲液B：20mM醋酸钠 pH3.5
流速：3mL/min
 

图2.翌圣Butyl Agarose 4FF纯化峰图

优势：峰较高且分辨率较高。

图3.其它品牌纯化峰图

 

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