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细胞结团的原因及解决办法-低分子量葡聚糖硫酸钠(DSS)

细胞培养过程中,有时会出现细胞结团,此时的细胞大多是轮廓模糊、透光性差,甚至会出现合胞体,伴有细胞碎片,这证明细胞已经衰老或产生病变,状态不佳。


是什么导致了细胞结团?



1. 过度消化某些用于组织分解的酶,如胰蛋白酶,如果过量使用会导致细胞结块

2. 环境压力物理压力和反复的温度变化会导致细胞死亡,从而导致细胞的“粘性”的DNA分子将相邻的细胞连接在一起

3. 组织分解在制备单细胞悬浮液时,使用酶、机械或化学分解策略可使细胞破裂,从而导致碎片的聚团

4. 过度生长当细胞在其培养基中密度过大的时候,细胞将开始溶解并释放碎片,碎片中的粘性因子会将细胞聚集到一起

5. 污染某些细菌和真菌病原体导致细胞溶解结块通常是细胞培养物被污染的迹象


怎样减少细胞结团?



1. 低密度传代。将已聚集的细胞进行消化传代,连续传三次,细胞抱团就会越来越小,这样几代过后,再按照常规消化方法和时间能将细胞逐渐传成单个细胞;

2. 选择适当的离心转速和时间离心聚团细胞。通常情况下,较快的速度可以离心散细胞,但在高速下也必须考虑细胞的脆弱性,所以适当的延长离心的时间也不失为一种较好的将悬浮聚团细胞离心散开的方法,但转速及时间要通过实验来把握。

3. 添加DNA酶I的内切酶。可以混合到培养基中,从破裂的细胞中分离DNA,分解这些多余的碎片有助于保持靶细胞生长的空间。但是,dna酶I使用过多会导致细胞突变,最终会影响实验效果,所以不到万一,不建议使用。

4. 添加低分子量葡聚糖硫酸钠盐。可以混合到培养基中,通过改变细胞表面电荷,促使单个细胞悬浮,防止结团,安全有效。例如CHO细胞,推荐浓度10~50mg/L以达到防止结团的效果。


翌圣生物提供高品质葡聚糖硫酸钠



葡聚糖硫酸钠Dextran sulfate sodium salt,DSS)是葡聚糖的聚阴离子衍生物,由葡聚糖和氯磺酸的酯化反应形成,以钠盐形式提供,并通过添加少量磷酸盐进行稳定。

Dextran sulfate sodium salt,Mw 5,000 葡聚糖硫酸钠,平均分子量约5 kD可通过改变细胞表面的电荷,来促使单个细胞悬浮,防止细胞结团,支持细胞高密度培养,提高细胞活力。



1.png 

图1.硫酸葡聚糖钠盐结构式




产品特点


1、 性能优良:纯度高(98%),含硫量16~20%;

2、 稳定性高:聚阴离子复合物,可溶于水,形成无色溶液,形似天然粘多糖;

3、 安全无毒:可被自然降解,对细胞伤害较小



更多应用场景


1、 支持高密度培养,阻止细胞团,提高细胞活力

2、 具有抗病毒活性:阻止病毒进入宿主,抑制病毒的复制;

3、 作为合成纳米颗粒的原料,用于研究药物包封率等;

4、 抑制P53诱导的细胞凋亡,扮演抗凋亡(anti-apoptotic)作用;

5、 激活分子伴侣介导的细胞自噬或巨自噬等;

6、 具有抑制补体通路及抗凝作用;

7、 在缺血再灌注损伤模型中,减少血管内皮组织的损伤;




价格对比


1663553439642420.png 



性能对比



品牌

进口品牌S*

翌圣生物

含硫量

16.0-20.0%

16.0-20.0%

游离硫

/

<0.2%

溶解度

H2O:0.1 g/mL,澄清,无色至微黄色

H2O:0.1 g/mL澄清或者轻微模糊的黄色溶液





产品订购



产品名称

货号

规格

价格(元)

Dextran sulfate sodium salt,Mw 5,000   葡聚糖硫酸钠

60316EG25

25 g

2187.00

Dextran sulfate sodium salt,Mw 5,000   葡聚糖硫酸钠

60316EG60

100 g

4387.00

Dextran sulfate sodium salt,Mw 5,000   葡聚糖硫酸钠

60316EG76

500 g

15687.00

Dextran sulfate sodium salt,Mw 5,000   葡聚糖硫酸钠

60316EG80

1 kg

23687.00





葡聚糖硫酸钠系列产品




产品名称

产品编号

规格

价格(元)

应用场景

Dextran    sulfate Sodium Salt(DSS)结肠炎建模用葡聚糖硫酸钠盐   MW:36000~50000

60316ES25/60/76/80

25g/100g/500g/1kg

1255/3855/16855/32855

促销价:955/2655/9655/18655)

结肠炎造模

Dextran    sulfate sodium salt,Mw 500,000 葡聚糖硫酸钠

60316EA25/60/76/80

25g/100g/500g/1kg

537/1537/4837/8537

1)可提高核酸杂交率

2)沉淀脂蛋白

3)具有抗病毒活性

4)分离细菌、病毒、蛋白质及核酸等

5)可抑制一些胆固醇酯水解酶活性

Dextran    sulfate sodium salt,Mw 50,000 葡聚糖硫酸钠

60316EB25/60/76/80

25g/100g/500g/1kg

2187/4387/15687/23687

1)多糖测定标准品

2)刺激B淋巴细胞增殖

3)脂蛋白沉淀剂

4)具有抗病毒活性

Dextran    sulfate sodium salt,Mw 20,000 葡聚糖硫酸钠

60316EC25/60/76/80

25g/100g/500g/1kg

2187/4387/15687/23687

1)蛋白纯化过程中可以去除脂类的污染

2)分子实验

3)具有抗病毒活性

Dextran    sulfate sodium salt,Mw 15,000 葡聚糖硫酸钠

60316ED25/60/76/80

25g/100g/500g/1kg

2187/4387/15687/23687

具有抗病毒活性

Dextran    sulfate sodium salt,Mw 10,000 葡聚糖硫酸钠

60316EF25/60/76/80

25g/100g/500g/1kg

2187/4387/15687/23687

1)作为体积排阻剂有助于核酸杂交

2)作为合成纳米颗粒的原料,用于研究药物包封率等

3)具有抗病毒活性

Dextran    sulfate sodium salt,Mw 3,000 葡聚糖硫酸钠

60316EH25/60/76/80

25g/100g/500g/1kg

2187/4387/15687/23687

具有抗病毒活性

Dextran    sulfate sodium salt,Mw 1,500 葡聚糖硫酸钠

60316EI25/60/76/80

25g/100g/500g/1kg

2187/4387/15687/23687

具有抗病毒活性

 





葡聚糖硫酸钠系列产品客户发文(不完全统计)


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