在所有RNA实验中,RNA的纯度和完整性能够直接影响RNA分析的结果。RNA酶污染是导致实验失败的主要原因,RNA制剂中微量的RNase污染足以导致样本中RNA的完全降解。外源性的RNase存在于试剂、耗材、器械、操作人员的皮肤或唾液中,也可存在于空气、灰尘中。而各种组织和细胞中则含有大量内源性的RNase。因此,在实验中,想要避免RNA被降解,一方面要严格控制外源性RNase的污染,使用无RNase的耗材,尽量避免源自人和环境的RNase污染。另一方面,要最大限度地抑制内源性的RNA酶,使用RNA抑制剂来抑制RNase的活性。
图1. 常用的RNase抑制剂
常见的RNase抑制剂有焦碳酸二乙酯(DEPC)、异硫氰酸胍、氧钒核糖核苷复合物(RVC)和RNA酶的蛋白质抑制剂(RNasin)。其中,DEPC和异硫氰酸胍具有一定的毒性,RVC对PCR聚合酶有抑制作用,不利于展开后续的实验。RNA酶的蛋白质抑制剂是一种从大鼠肝或人胚盘中提取得来的酸性糖蛋白,能够特异地与RNase以非共价键结合,形成复合体使RNase失活,不具有毒性,不影响后续的PCR实验,常被用来减少RNase的污染。
产品特点
翌圣生物MRI与人源RNase inhibitor相比,具有更高的抗氧化活性,适合于对高DTT敏感性实验,除此之外,翌圣MRI还具有以下特点:
广谱的RNase抑制活性:可抑制包括RNase A、RNase B、RNase C等在内的RNase。
兼容广泛的反应条件:在pH 5.0至9.0条件下和25℃至60℃的温度下都具有活性。
兼容广泛的下游实验:对SP6、T7/T3 RNA聚合酶、AMV、M-MLV逆转录酶和Taq DNA聚合酶酶活性无影响。
规模化量产:单次生产20亿U,确保了产品的均一性、稳定性和供货的及时性,有利于成本控制。
批间稳定性:成熟的蛋白表达和纯化平台,符合ISO13485质量管理体系,根据质量标准进行质控检测,保证批次间产品的稳定性。
产品性能
RNase Inhibitor可有效抑制RNase活性
1μg HEK细胞总RNA,1μL RNase inhibitor可有效抑制5ng RNase。
图2. RNase抑制剂抑制效果图
RNase Inhibitor在qPCR实验中表现优于国际同类产品
在相同实验条件下,以qPCR方法分别对翌圣和R*公司的鼠源RNase抑制剂(MRI)的抑制效果进行检测,翌圣鼠源RNase抑制剂能有效抑制体系中的RNaseA,抑制效果优于竞品。
图3. R* MRI抑制RNase能力测试
注:图中曲线从左到右依次为:PC(仅RNA,无RNase和MRI)、40 U MRI、30 U MRI、20 U MRI、10 U MRI、NC(RNA+RNase、无MRI)。
图4. Yeasen MRI抑制RNase能力测试
注:图中曲线从左到右依次为:PC(仅RNA,无RNase和MRI)、80 U MRI、60 U MRI、40 U MRI、30 U MRI、20 U MRI、10 U MRI、NC(RNA+RNase、无MRI)。
图5. 图3与图4 Ct值结果柱状图
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