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甜菜碱 Betaine——高性能的PCR增强剂

      为提高含高GC含量或连续多个A/T的复杂基因的PCR扩增效率及扩增特异性,科研人员通常会尝试在PCR反应体系中添加增效剂。翌圣生物现为广大科研人员提供质量高、适用性广的两种PCR增效剂:甜菜碱与海藻糖。

 

甜菜碱

甜菜碱是一种从甜菜中发现的生物碱,是胆碱氧化代谢的终产物,参与甲硫氨酸(蛋氨酸)生物合成路径,是非常重要的渗透调节物质。翌圣生物提供的甜菜碱有两类,盐酸甜菜碱和甜菜碱水合物,后者分子式为C5H11NO2 H2O,是分子生物学级别,纯度(TLC)≥99%,可用于分子生物学实验。

 

产品介绍

翌圣生物是在工具酶及其反应辅助试剂方面极具经验,确保原装进口高品质甜菜碱,并大量现货,可保证批次间产品的稳定性。该产品可作为原料用于PCR、RT-PCR、qPCR等实验反应优化的添加剂成分,大大改善扩增效率和扩增特异性、改善逆转录效率等。

 

甜菜碱特点

1. 甜菜碱可帮助DNA聚合酶顺利通过DNA某些复杂二级结构,防止DNA聚合酶的从模板DNA中解离。DNA局部区域因含有多个复杂碱基(Py-G-C),会促使DNA聚合酶的停滞,最终导致DNA聚合酶停止有效延伸。而甜菜碱可提高DNA小沟中富含鸟嘌呤和胞嘧啶区域的鸟嘌呤和胞嘧啶的水合作用,影响DNA分子结构,改变DNA灵活性,帮助DNA聚合酶沿着DNA模板延伸[1]。

2. 甜菜碱可消除变性温度对碱基的依赖性。浓度依赖性降低高GC含量序列的Tm,并使PCR两引物的Tm相接近,最终降低DNA Tm值[2]。

3. 高浓度的甜菜碱溶液可稳定DNA-蛋白复合物。

4. 在逆转录温度条件下,甜菜碱可减少RNA二级结构的形成。在甜菜碱和海藻糖联合用于逆转录实验时,甜菜碱减少RNA分子内复杂二级结构的形成,降低RNA溶解温度;海藻糖稳定逆转录酶,保持逆转录酶活性。通过二者联合,确保更长cDNA的合成长度[3]。

 

主要应用

1. 可应用于DNA的测序反应实验中,提升含有重复序列(连续多个A或T)的测序精准性。

2. 提升长片段DNA的PCR成功率。

3. 适用于复杂模板的PCR扩增,如高GC含量DNA的PCR扩增。

4. 适用于某些粗糙模板的直接测序,如经NaOH溶液裂解的细胞裂解物。

5. 适用于较长cDNA的逆转录反应。

6. 作为LAMP环介导等温扩增的添加剂。

 

甜菜碱参数

中文别名(Chinese Synonym)

甜菜碱一水合物,一水甜菜碱,三甲基甘氨酸一水合物

英文别名(English Synonym)

Betaine monohydrate;(Carboxymethyl) trimethylammonium hydroxide monohydrate

CAS号(CAS NO.)

590-47-6

分子式(Formula)

C5H11NO2 H2O

分子量(Molecular Weight)

135.16g/mol

外观(Appearance)

晶体粉末

纯度(Purity)

≥99%

溶解性(Solubility)

溶于水,可配置成10%水溶液

结构式(Structure)

image.png 

 

溶液配制

溶于水。浓度为10%水溶液,质量体积比。溶液无色透明。

 

参考文献

[1]. Mytelka DS,Chamberlin MJ. Analysis and suppression of DNA polymerase pauses associated with a trinucleotide consensus. Nucleic Acids Res.1996 Jul 15;24(14):2774-81.

[2]. Rees WA,Yager TD,Korte J,von Hippel PH. Betaine can eliminate the base pair composition dependence of DNA melting. Biochemistry.1993 Jan 12;32(1):137-44.

[3]. Spiess AN,Ivell R. A highly efficient method for long-chain cDNA synthesis using trehalose and betaine. Anal Biochem.2002 Feb 15;301(2):168-74.

 

相关链接

海藻糖在分子生物学实验中的应用可参看:分子级别海藻糖(Trehalose)的特点及在分子实验中的应用——高效的酶稳定剂

 

订购信息

产品货号

产品名称

规格

价格(元)

60391ES60

Betaine 甜菜碱(分子生物学级别)

100g

286.00

60391ES76

Betaine 甜菜碱(分子生物学级别)

500g

956.00

 

 

 

400-6111-883