细胞学实验中必不可少的试剂就是平衡盐溶液，它可以保护细胞免受pH波动的影响，平衡细胞膜的渗透压。平衡盐溶液通常包括钠 (Na)、磷酸钠 (Na₃PO₄)、钾 (K)、钙 (Ca)、镁 (Mg) 和氯化物 (Cl)。K和Na调节渗透性和张力，而Mg和Ca保持细胞膜和内部结构的完整性。通过磷酸盐和碳酸氢盐，平衡盐溶液还能控制氢离子浓度，有些还包括葡萄糖等碳水化合物，可以为细胞提供能量。 

图源：pixabay

 

D-PBS、HBSS、EBSS是什么？

 

D-PBS

即Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline，杜氏磷酸缓冲盐溶液，是生物学、生物化学研究中使用较广泛的一种平衡盐溶液，DPBS和PBS成分是一样的，区别在于DPBS的Na₂HPO₄与KH₂PO₄的添加量略小于PBS。DPBS主要用于胚胎学方面的研究，可作为胚胎、组织、细胞的漂洗液、冻存液和培养液。可根据需要在D-PBS中加入葡萄糖、丙酮酸钠等，以维持培养物的基本营养。

 

HBSS

即Hank's Balanced Salt Solution，Hank's平衡盐溶液，是细胞分离或培养中常用的磷酸盐缓冲液之一，主要成分为NaCl，KCl，KH₂PO₄，Na₂HPO₄，NaHCO₄和葡萄糖，具有维持渗透压、保持pH稳定、提供简单营养等作用，可用于体外实验中组织块、器官或细胞的漂洗、细胞或组织的运输、细胞培养用试剂的配制以及作为细胞计数的稀释液，也可用于细胞摄取、转运等实验。

 

EBSS

即Earle's Balanced Salt Solution，Earle's平衡盐溶液，是细胞分离或培养中常用的磷酸盐缓冲液之一。EBSS专为CO₂环境中的细胞短期维持而设计，主要成分为葡萄糖，NaHCO₃，NaCl，KCl和Na₂HPO₄，具有维持渗透压、保持pH稳定、提供简单营养等作用，可用于体外实验中组织块、器官或细胞的漂洗、细胞或组织的运输、细胞培养用试剂的配制以及作为细胞计数的稀释液，也可用于诱导细胞自噬等。

 

D-PBS、HBSS、EBSS的区别

 

Q:D-PBS与PBS的区别？

A:DPBS和PBS成分是一样的，区别在于DPBS的Na₂HPO₄与KH₂PO₄的添加量略小于PBS。DPBS主要用于胚胎学方面的研究，可作为胚胎、组织、细胞的漂洗液、冻存液和培养液。

Q:HBSS和PBS/DPBS有什么区别？

A:相比较而言，HBSS缓冲液中盐成分较PBS和DPBS更复杂，且有葡萄糖，可为细胞提供简单的营养，而PBS和DPBS中只有磷酸根，钠，钾，氯离子，只是最简单的盐平衡缓冲液，不能为细胞提供暂时的营养。

Q:EBSS和HBSS有什么区别？

A:HBSS和EBSS是多数培养基的基础溶液，两者的主要区别是缓冲能力不同。HBSS的NaHCO₃含量较低（0.35克/升），其缓冲能力较弱，一般用空气平衡，即利用空气中的CO₂使溶液pH值平衡。EBSS含有高浓度的NaHCO₃（2.2克/升），其缓冲能力较强，溶液pH值需在5％的CO₂培养箱中才能达到平衡。如果希望在CO₂培养箱中保存组织，需要用EBSS。如果仅仅是清洗将要在细胞培养基中储存的组织，用HBSS液就可以了。

 

平衡盐缓冲液的选择

 

 

 

酚红：PH指示剂，培养细胞，尤其是哺乳类细胞时，不加酚红。由于酚红干扰检测，一般在做流式细胞检测时，使用无酚红产品。

含有钙镁离子的缓冲液：通常用于作输送介质、试剂的制备

不含钙镁离子的缓冲液：通常用于细胞清洗

 

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产品名称	货号	规格
Hank's 平衡盐溶液（HBSS） 含钙、镁离子，不含酚红，1X	60147ES76	500mL
Hank's 平衡盐溶液（HBSS） 不含钙、镁离子和酚红，1X	60148ES76	500mL
Earle's 平衡盐溶液 (EBSS) 不含钙、镁离子和酚红，1X	60150ES76	500mL
Earle's 平衡盐溶液 (EBSS) 含钙、镁离子和酚红，1X	60151ES76	500mL
D-PBS，不含钙、镁离子，1X	60152ES76	500mL
Hank's 平衡盐溶液（HBSS） 不含钙、镁离子和酚红，10X	60149ES76	500mL

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