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如何选择一款合适的转染试剂？

化学转染方法是生物医学研究中最常用的转染方法。转染试剂已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规试剂，在基因功能研究、基因表达调控、突变分析，以及基因治疗、细胞治疗、蛋白生产、疫苗生产等方面应用广泛。
 

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图1. 核酸转染（源自《Advanced Materials》）


现在市面上转染试剂种类繁多，质量良莠不齐，如何选择一款合适的转染试剂会显得比较棘手。在考虑合适的转染试剂时，要考虑转染的物质（DNA、RNA、蛋白）以及要转染的细胞特性。我们在往期的细胞转染注意事项，你都get了吗？（上）进行了初步的探讨，也在细胞转染注意事项，你都get了吗？（下）一文中进一步从细胞类型与核酸类型这2个纬度进行了翌圣品牌转染试剂的选择区分。本期将对不同的转染试剂进行详细说明。
 


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图2. 脂质体结构（源自Nature）

a. 最简单的脂质体，由磷脂双分子层构成的脂质囊泡；

b. “隐身”脂质体，通过PEG修饰实现长循环；

c. 大多数阳离子脂质体具有洋葱样结构，DNA夹在阳离子膜之间；

d. Kubitschke等人报道的新型脂质体，由花瓶状的脂质分子(分子两侧有疏水链和亲水链)组成双分子层

 

Hieff Trans 脂质体核酸转染试剂-40802ES


40802对标Lipofectamine 2000，操作简便，适合血清存在的培养基，转染前后无需更换培养基，细胞仍保持很好的活性，经济实用，对大多数细胞均具有较高的转染效率，价格低，具有很高的性价比。通常情况下对于24孔板转染，每次用1.5 μL左右，则1 mL Hieff TransTM约可做660次转染；对于6孔板，每次用6 μL左右，则1 mL Hieff TransTM约可做160次转染。


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图3. Hieff transTM与Lipo2000在293T细胞转染DNA效果图（源自复旦大学）

 


采用40802产品发表的文献众多，受到广泛好评，应用于各种研究方向，举例可见IF55分！翌圣转染试剂助力高分文章，根据2022年最新的SCI影响因子，华东理工大学生物工程学院杨弋团队采用40802发表在《Nature Biotechnology》杂志的文章影响因子已达68.164。


在部分研究中，40802也用于慢病毒包装，可见超燃！翌圣转染试剂助力这个团队连发3篇IF10+文章

 

磷酸钙法细胞转染试剂-40803ES

40803是在传统磷酸钙法的基础上经过特别优化，不仅在转染效率有了较大提高，且降低了细胞毒性，特别适合于293或293T细胞的转染，对其他大多数常见细胞如Hela、CHO也具有较好的转染效果，不仅适用于细胞的瞬时转染，且适用于稳转株的筛选。

 

Polybrene(hexadimethrine bromide) 聚凝胺-40804ES

本产品目前广泛用于逆转录病毒介导的基因转染，慢病毒介导的基因转染。

 

Hieff Trans™悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂-40805ES

40805经优化专门用于悬浮细胞的转染，且适用于DNA、RNA和寡核苷酸的转染，对大多数真核细胞具有很高的转染效率。


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图4. PEI转染DNA示意图（源自网络）

 

 

Hieff Trans™ siRNA/miRNA体外转染试剂-40806ES

40806是一种非脂质体PEI阳离子、两性分子转染试剂，为siRNA转染到哺乳动物细胞中而开发。适用于siRNA和miRNA的转染。可在广泛的细胞系中，实现1 nM的siRNA超过90%的表达效率。操作简便，兼容血清和抗生素，无需更换培养基。

 

Hieff Trans™通用型转染试剂-40808ES

40808对标Lipofectamine 3000，是我们最新推出的产品，基于新的纳米技术研发的一款多用途、便捷高效的脂质体转染试剂，适用于DNA、RNA和寡核苷酸的转染，对包括原代细胞、神经细胞在内的难转染细胞都具有较高的转染效率。适合血清存在的培养基，转染前后无需更换培养基，细胞仍保持很好的活性。


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图5. Hieff TransTM通用型转染试剂转染试剂用EGFP表达质粒转染细胞后的荧光图。左图为293T细胞，右图为MCF-7细胞。

 

 

线性PEI转染试剂MW25000-40815ES

40815是一种高电荷阳离子聚合物，非常容易结合带负电荷的核酸分子，形成复合物，并使该复合物进入细胞中。该转染试剂是一种瞬时转染试剂，细胞毒性低，转染效率高，在HEK293和CHO等细胞中基因表达效率较高。

 

 

 

线性PEI转染试剂（速溶型）MW40000-40816ES

PEI 40000与PEI 25000转染试剂相比，具有很多优点。包括：
1. PEI 40000较易溶解，可直接在水中溶解；
2. PEI 40000操作简便，更易于使用，且比PEI 25000的转染效果好；
3. PEI 25000含有4-11%的丙酰基残留，其能阻止聚合物主链与DNA结合。相较于PEI 25000，PEI 40000是完全脱落的结构，因此其性能始终高效如一。

 


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图6. PEI40000转染GFP表达质粒到细胞后荧光图。左图为贴壁细胞Hek-293，转染效率达到90%；右图为悬浮细胞CHO-K1，转染效率达到80%。

采用40816产品发表的文献众多，也受到广泛好评，其中西湖大学生命科学学院陶亮团队发表在《Cell》（IF：66.85）的文章也采用了本产品，可见翌圣明星CP--转染试剂与PCR产品又登《Cell》期刊
不同细胞系转染效率通常不同，但细胞系的选择通常是根据实验的需要，因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。罕见的细胞培养，如神经元和原代细胞等通常难以转染，在转染试剂选择时候更需要慎重与预期的降低。
针对DNA转染试剂与RNA转染试剂，翌圣生物拥有雄厚的研发与生产团队，不断优化配方，改良生产工艺，推出了多款以阳离子脂质体与阳离子聚合物为基础的产品，为广大科研院校与企业提供全方位的产品，产品线覆盖转染试剂涉及的各个领域。

 

高分保障

目前翌圣转染试剂系列的产品已经荣登《Nature》《Cell》等多个顶级期刊，获得科研大牛们认可！
以下仅展示部分论文：

 

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[1] Liu R, Yang J, et al. Optogenetic control of RNA function and metabolism using engineered light-switchable RNA-binding proteins. Nat Biotechnol. 2022 Jan 3. (IF:68.164)华东理工大学生物工程学院杨弋团队

[2] Zhou J, Chen P, et al. Cas12a variants designed for lower genome-wide off-target effect through stringent PAM recognition. Mol Ther. 2022 Jan 5.(IF:12.910)武汉大学生命科学学院殷雷团队

[3] Chen S, Cao X, et al. circVAMP3 Drives CAPRIN1 Phase Separation and Inhibits Hepatocellular Carcinoma by Suppressing c-Myc Translation. Adv Sci (Weinh). 2022 Jan 24.(IF:17.694)中国科学院北京生命科学研究院赵方庆团队

[4] Gu C, Wang Y, et al. AHSA1 is a promising therapeutic target for cellular proliferation and proteasome inhibitor resistance in multiple myeloma. J Exp Clin Cancer Res. 2022 Jan 6.(11.161)南京中医药大学杨烨顾春艳团队

[5] Zhang Y, Yu X, et al. Splicing factor arginine/serine-rich 8 promotes multiple myeloma malignancy and bone lesion through alternative splicing of CACYBP and exosome-based cellular communication. Clin Transl Med. 2022 Feb.(11.492)南京中医药大学杨烨顾春艳团队

[6] Qin J, Cai Y, et al. Molecular mechanism of agonism and inverse agonism in ghrelin receptor. Nat Commun. 2022 Jan 13.(17.681)四川大学生物治疗国家重点实验室邵振华团队

[7] Tang X, Deng Z, et al. A novel protein encoded by circHNRNPU promotes multiple myeloma progression by regulating the bone marrow microenvironment and alternative splicing. J Exp Clin Cancer Res. 2022 Mar 8.(12.658)南京中医药大学杨烨顾春艳团队

[8] Xie F, Su P, et al. Engineering Extracellular Vesicles Enriched with Palmitoylated ACE2 as COVID-19 Therapy. Adv Mater. 2021 Oct 19. (IF:30.849)苏州大学生物医学研究院周芳芳团队和浙江大学生命科学研究院张龙团队

[9] Liang Y, Lu Q, et al. Reactivation of tumour suppressor in breast cancer by enhancer switching through NamiRNA network. Nucleic Acids Res. 2021 Sep 7.(IF:16.9)复旦大学生物医学研究院于文强团队

[10] Fan Y, Wang J, et al. CircNR3C2 promotes HRD1-mediated tumor-suppressive effect via sponging miR-513a-3p in triple-negative breast cancer. Mol Cancer. 2021 Feb 2.(IF:27.403)南京医科大学附属逸夫医院苏东明团队

[11] Dai L, Dai Y, et al. Structural insight into BRCA1-BARD1 complex recruitment to damaged chromatin. Mol Cell. 2021 Jul 1.(IF:17.97)浙江大学生命科学研究院黄俊团队和中科院生物物理所周政团队

[12] Zhang K, Wang A, et al. UBQLN2-HSP70 axis reduces poly-Gly-Ala aggregates and alleviates behavioral defects in the C9ORF72 animal model. Neuron. 2021 Jun 16.(IF:17.17)中国科学院生物与化学交叉研究中心王文元团队

[13] Li T, Chen X, et al. A synthetic BRET-based optogenetic device for pulsatile transgene expression enabling glucose homeostasis in mice. Nat Commun. 2021 Jan 27.(IF:14.92)华东理工大学生物工程学院杨弋团队

[14] Pan Y, He X, et al. Neuronal activity recruits the CRTC1/CREB axis to drive transcription-dependent autophagy for maintaining late-phase LTD. Cell Rep. 2021 Jul 20.(IF:9.420)浙江大学脑科学与脑医学学院马欢团队

[15] Liu H, Xing R, et al. G-protein-coupled receptor GPR17 inhibits glioma development by increasing polycomb repressive complex 1-mediated ROS production. Cell Death Dis. 2021 Jun 12.(IF:8.463)厦门大学生命科学学院陈颖团队

[16] Yan F, Huang C, et al. Threonine ADP-Ribosylation of Ubiquitin by a Bacterial Effector Family Blocks Host Ubiquitination. Mol Cell. 2020 May 21.(IF:17.97)浙江大学生命科学研究院朱永群团队

[17] Luo Q, Wu X, et al. TRIM32/USP11 Balances ARID1A Stability and the Oncogenic/Tumor-Suppressive Status of Squamous Cell Carcinoma. Cell Rep. 2020 Jan 7.(IF:9.42)中国医学科学院分子肿瘤学国家重点实验室刘芝华团队

[18] Sun X, Peng X, et al. ADNP promotes neural differentiation by modulating Wnt/β-catenin signaling. Nat Commun. 2020 Jun 12.(IF:14.911)中国科学院水生生物研究所孙玉华团队

[19] Yang X, Wang H, et al. Rewiring ERBB3 and ERK signaling confers resistance to FGFR1 inhibition in gastrointestinal cancer harbored an ERBB3-E928G mutation. Protein Cell. 2020 Dec.(IF:14.872)浙江大学医学院/转化医学研究院闵军霞团队

[20] Zou Y, Wang A, et al. Analysis of redox landscapes and dynamics in living cells and in vivo using genetically encoded fluorescent sensors. Nat Protoc. 2018 Oct.(IF:13.490)华东理工大学生物工程学院杨弋、赵玉政团队

[21] Zhang K, Zhao X, et al. Enhanced Therapeutic Effects of Mesenchymal Stem Cell-Derived Exosomes with an Injectable Hydrogel for Hindlimb Ischemia Treatment. ACS Appl Mater Interfaces. 2018 Sep 12.(IF:8.09)南开大学医学院李宗金团队

[22] Hao H, Hu S, et al. Loss of Endothelial CXCR7 Impairs Vascular Homeostasis and Cardiac Remodeling After Myocardial Infarction: Implications for Cardiovascular Drug Discovery. Circulation. 2017 Mar 28.(IF:29.69)中国医学科学院/北京协和医学院阜外医院王淼团队

 

科研路上会遇到各种磕磕绊绊，小翌助您过关斩将，每天都出好数据。

 

转染试剂产品目录

应用场景

名称

货号

规格

细胞类型：贴壁/悬浮

核酸类型：DNA、siRNA

Hieff Trans® 脂质体核酸转染试剂

40802ES02

0.5 mL

40802ES03

1.0 mL

40802ES08

5×1 mL

细胞类型：贴壁/悬浮
核酸类型：DNA

磷酸钙法细胞转染试剂

40803ES70

200 T

用途：病毒感染、DNA转染

聚凝胺（10 mg/ml）

40804ES76

500 μL

40804ES86

5×500 μL

细胞类型：悬浮
核酸类型：DNA、siRNA

Hieff Trans® 悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂

40805ES02

0.5 mL

40805ES03

1.0 mL

40805ES08

5×1 mL

细胞类型：贴壁/悬浮
核酸类型：siRNA、miRNA

Hieff Trans® siRNA/miRNA体外转染试剂

40806ES01

0.1 mL

40806ES02

0.5 mL

40806ES03

1.0 mL

细胞类型：贴壁/悬浮
核酸类型：DNA、siRNA、miRNA

Hieff Trans® 通用型转染试剂

40808ES02

0.5 mL

40808ES03

1 mL

40808ES08

5×1 mL

细胞类型：贴壁/悬浮
核酸类型：mRNA

Hieff Trans® mRNA转染试剂

40809ES01

0.1 mL

40809ES03

1 mL

细胞类型：贴壁/悬浮
核酸类型：DNA

PEI转染试剂MW25000

40815ES03

1 g

40815ES08

5×1 g

细胞类型：贴壁/悬浮
核酸类型：DNA

线性PEI转染试剂（速溶型）MW40000

40816ES02

100 mg

40816ES03

1 g

细胞类型：293
核酸类型：DNA
用途：AAV/LV载体研发与工艺开发

Hieff Trans® PEI转染试剂

40820ES04

1.5 mL

40820ES10

10 mL

40820ES60

100 mL

细胞类型：293

核酸类型：DNA

用途：AAV/LV载体大规模生产

Hieff Trans® PEI Transfection Reagent-GMP

40821ES10

10 mL

40821ES60

100 mL

40821ES80

1 L

 

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400-6111-883