产品简介

 

Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase mix是即用型2×预混溶液，包含Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase，dNTP以及对高通量测序文库扩增而精心优化的缓冲体系，具有灵敏度高、特异性强、保真性好等优点。在进行扩增反应时，体系只需加入引物和模板即可，简化了实验操作步骤，减少了人为误差，提高了实验通量和结果的重复性。本产品提供是所有试剂组分均经过严格质检，最高程度保障产品优异性能和批次间稳定性。

 

储存条件

 

-25~-15℃保存，有效期18个月。

 

使用说明

 

使用说明正文

1. 文库扩增反应体系（冰上配制）

1. 将表1中试剂解冻后颠倒混匀，置于冰上备用。
2. 于无菌PCR管中配制表1所示反应体系。

 

表1. PCR扩增反应体系

组分	体积 (µL)
模板DNA	X
正向引物 (10-25 μM）	1-2.5
反向引物 (10-25 μM）	1-2.5
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase mix	25
ddH2O	Total to 50

3. 使用移液器轻轻吹打货震荡混匀，并短暂离心将反应液收集至管底。
4. 将PCR管置于PCR仪中，设置表2所示反应程序，进行PCR扩增。

 

 

表2. PCR扩增反应程序

温度	时间	循环数
98°C	1 min	1
98°C	10 sec	1-15（根据实验要求）
60°C	30 sec
72°C	30 sec
72°C	5 min	1
4°C	Hold	-

【注】：

1)预变性温度推荐使用98°C。预变性推荐时间：质粒DNA等简单模板为30 sec；文库为1 min；cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min；高GC含量模板为5-10 min。

2) 退火温度推荐使用60°C，也可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间为20 sec，可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。

3) 延伸温度和时间：推荐使用72°C，延伸时间根据实际需要进行调整。

 

注意事项

 

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20240808