产品描述

KLF4-Luc萤光素酶报告基因（报告基因质粒）(KLF4 luciferase reporter plasmid)是翌圣生物自主研发的用于检测KLF4转录活性水平为目的的报告基因。KLF4(Krüppel-like factor 4)作为真核生物转录因子，参与调控细胞增殖、分化、胚胎发育等重要生命过程，是体细胞重编程为诱导多能干细胞(ips)的重要诱导因子之一。

KLF4报告基因主要用于检测细胞KLF4信号通路中KLF4的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pKLF4-Luc是翌圣生物改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个KLF4结合位点，可以高灵敏度地检测KLF4的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，在保持原有功能不变的情况下，增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小，使得KLF4报告基因质粒更易于转染。

 

质粒图谱

 

载体元件信息

KLF4 response element (KLF4)	32-75
Minimal TA promoter (pTA)	104-126
Luciferase reporter gene	158-1820
SV40 late poly(A) signal	1855-2076
SV40 early promoter	2124-2542
Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor) coding region	2567-3361
Synthetic poly(A) signal	3386-3434
Synthetic Beta-lactamase(Ampr) coding region	4549-5409
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site	5514-5667

 

运输与保存方法

冰袋运输。-20ºC保存。保质期1年。

 

注意事项

1）本质粒未经翌圣生物允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。

2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和戴一次性手套。

3）本产品仅作科研用途！

4）不提供该质粒序列信息。

 

使用说明

1）pKLF4-Luc可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用萤光素酶检测试剂盒或双萤光素酶检测试剂盒进行检测。

2）KLF4的激活剂，可作为KLF4报告基因的阳性对照。

3）首次使用1 µg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。

 

参考文献

[1] Han M J, Kim H R, O'Reilly C, et al. Purification of functional reprogramming factors in mammalian cell using FLAG-Tag[J]. Biochemical and biophysical research communications, 2017, 492(2): 154-160.

[2] Lin Z S, Chu H C, Yen Y C, et al. Krüppel-like factor 4, a tumor suppressor in hepatocellular carcinoma cells reverts epithelial mesenchymal transition by suppressing slug expression[J]. PloS one, 2012, 7(8): e43593.

[3] Shi J, Zheng B, Chen S, et al. Retinoic acid receptor α mediates all-trans-retinoic acid-induced Klf4 gene expression by regulating Klf4 promoter activity in vascular smooth muscle cells[J]. Journal of Biological Chemistry, 2012, 287(14): 10799-10811.

[4] Fang Y, Davies P F. Site-specific microRNA-92a regulation of Krüppel-like factors 4 and 2 in atherosusceptible endothelium[J]. Arteriosclerosis, thrombosis, and vascular biology, 2012, 32(4): 979-987.

[5] Kazumori H, Ishihara S, Takahashi Y, et al. Roles of Krüppel-like factor 4 in oesophageal epithelial cells in Barrett's epithelium development[J]. Gut, 2011, 60(5): 608-617.

 

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HB211109