一、中草药分子检测背景

中草药存在同名异物、同物异名、掺伪混充等问题，传统性状、显微与理化实验方法难以精准鉴定。DNA条形码、PCR、测序等分子检测技术，以核酸为依据可以实现精准基因鉴定，而高质量DNA/RNA是分子检测成功的前提，中草药样本的特性导致其核酸提取难度显著高于动物与普通植物。

二、中草药DNA/RNA提取核心难点

1. 次生代谢产物干扰

中草药富含多糖、多酚、单宁、色素、脂类，多糖会与DNA共沉淀会形成难溶解的胶状杂质，影响核酸释放；多酚会氧化为醌类，与核酸共价结合导致褐变、降解并抑制PCR酶，影响下游扩增反应。

2. 样本降解严重

药材多为干燥、陈化、加工品，细胞破裂后核酸酶会持续降解核酸，DNA多为短片段，RNA极易完全降解。

3. 细胞壁与组织结构坚硬

木质化、纤维化程度高，常规研磨破碎不充分，核酸释放效率低。

三、解决方案

（一）样本前处理

• 优先选用幼嫩组织，幼嫩组织的次数代谢产物和木质化、纤维化程度低，干燥药材用75%乙醇擦拭表面灭菌
• 液氮快速研磨成细粉（液氮可以保证低温和研磨充分），避免反复冻融，RNA提取全程低温、无RNase操作。

图 一边倒液氮一边研磨植物

（二）去除多酚与褐变

• 裂解液加入β-巯基乙醇、PVP、半胱氨酸，阻断氧化并结合多酚。
• 全程低温、快速操作，减少氧化时间。

（三）去除多糖

• 采用高盐缓冲液（1.0–2.5 mol/L NaCl），促进多糖与核酸分离。
• 异丙醇/乙醇分步沉淀；离心后弃去黏稠胶状沉淀，取上清。
• 选用多糖多酚专用植物试剂盒，配合选择性结合柱。

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货号	名称	备注
19292ES	MolPure® Plant Plus RNA Kit 多糖多酚植物RNA提取试剂盒	柱提法，操作简便，30 min即可完成总RNA的提取
18801ES	MolPure® Plant Plus DNA Kit 多糖多酚植物DNA提取试剂盒	柱提法，操作过程1 h完成。
18529ES	MolPure® Mag Plant DNA Kit磁珠法通用植物DNA提取试剂盒	磁珠法，操作过程1 h完成。
18534ES	MolPure® Mag Plant RNA Kit磁珠法通用植物RNA提取试剂盒	磁珠法，操作过程40min完成。
10604ES	RNAsafe Tissue Stabilizer RNAsafe动植物组织RNA稳定液	用于采集样本后保存样本，可以灭活内源RNA酶。
10609ES	Surface RNase Remover (with Spray Bottle) 固相RNase清除剂（含喷雾瓶）	适用于喷洒在台面等固体上，达到清除RNA酶的效果。