柠檬酸钠抗原修复液是一种最常用的抗原修复液。本产品在常规修复试剂基础上进行优化,更适用于使用多聚甲醛、甲醛或其他醛类试剂固定后的石蜡切片、冰冻切片等样品抗原修复。在相同染色条件下,本产品能够更有效去除因使用多聚甲醛、甲醛等醛类试剂固定后导致蛋白间的交联,并充分暴露样品中的抗原表位,从而改善免疫染色效果,获得的染色信号更强,背景更低。
运输和保存方法
冰袋运输。4℃保存,有效期1年。
使用方法
1)将本产品50倍稀释(注:100 mL的本产品稀释之后可以得到5000 mL 1×的抗原修复液)。
2)使用前需水浴锅或微波炉等使1×抗原修复液预热到95-100℃。
3)石蜡切片:
1.1脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡5 min,再换用新鲜的二甲苯脱蜡,共用二甲苯脱蜡3次。无水乙醇5 min,2次。90%乙醇5 min,2次,70%乙醇5 min,1次。蒸馏水5 min,2次。
1.2抗原修复:将切片浸泡在1×抗原修复液中,95-100℃加热约20 min(加热时间可以控制在10-30 min内,最佳加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索),之后冷却至室温(时间大约为20-30 min)。用免疫染色洗涤液(一般为PBS或TBS)洗涤1-2次,每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
冰冻切片:
用免疫染色洗涤液(一般为PBS或TBS)洗涤切片5 min。将切片浸泡在1×抗原修复液中,95-100℃加热约20 min(加热时间可以控制在10-30 min内,最佳加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索),之后冷却至室温(时间大约为20-30 min)。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次,每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
其他样品抗原修复:参考石蜡切片和冰冻切片进行操作。
注意事项
1)本抗原修复液使用前需用重蒸水或去离子水稀释50倍,配制成1×抗原修复液。按照每个片子大约需要10 mL 1×抗原修复液计算,一个包装的本产品可以用于500个片子的抗原修复。
2)抗原修复过程需使用耐热染色架进行操作。
3)抗原修复液使用前需预热,如果使用微波炉预热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5)本产品仅作科研用途!
HB190812