导读
阳离子脂质体
图1. 脂质体结构(源于Nature)
a.最简单的脂质体,由磷脂双分子层构成的脂质囊泡
b.“隐身”脂质体,通过PEG修饰实现长循环
c.大多数阳离子脂质体具有洋葱样结构,DNA夹在阳离子膜之间
d.Kubitschke等人报道的新型脂质体,由花瓶状的脂质分子(分子两侧有疏水链和亲水链)组成双分子层
同时,人们也一直在寻找更有效、毒性小,同时对研究影响也小的转染试剂。由于脂质类转染试剂对细胞的毒性是由其脂质特性决定的,众多的研究者和生物公司将新一代转染试剂的开发聚焦在非脂质体的聚合物上。
◆ 不含疏水部分而完全溶于水
◆ 方便地进行化学修饰
◆ 不像脂质体一样破坏细胞结构
◆ 浓缩DNA,将DNA运送到细胞内,并其在细胞核内释放
◆ 细胞毒性很低,很稳定
◆ 不被血清清除
◆ 毒性低、成本低、免疫原性低
◆ 可将外源基因转染到悬浮细胞或贴壁细胞中
图3. PEI转染DNA示意图(源于网络)
PEI是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔二个碳原子,即每第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”(proton sponge)体。自1995年PEI首次被用于DNA转染以来,就因其安全性和稳定性而被广泛应用于科学研究和基因疗法中。
图4. PEI使用效果图
a. PEI 40000转染GFP质粒到贴壁细胞Hek-293,72h后,转染效率达到90%(左图)
b.PEI 40000转染GFP质粒到悬浮细胞CHO-K1,72h后,转染效率达到80%(右图)
目前翌圣提供了多种转染试剂,客户可根据转染核酸的种类/贴壁细胞/悬浮细胞等条件,选择合适的转染试剂,我们将在下期进行说明。
[1]. Andrzej W.Cwetsch, Bruno Pinto, Annalisa Savardi, Laura Cancedda. In vivo methods for acute modulation of gene expression in the central nervous system. Progress in Neurobiology. 2018 September 2018, Pages 69-85. doi.org/10.1016/j.pneurobio.2018.04.008
应用场景 |
名称 |
货号 |
规格 |
细胞类型:贴壁/悬浮 核酸类型:DNA、siRNA |
40802ES02 |
0.5 mL |
|
40802ES03 |
1.0 mL |
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40802ES08 |
5×1 mL |
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细胞类型:贴壁/悬浮 |
40803ES70 |
200 T |
|
用途:病毒感染、DNA转染 |
40804ES76 |
500 μL |
|
40804ES86 |
5×500 μL |
||
细胞类型:悬浮 |
40805ES02 |
0.5 mL |
|
40805ES03 |
1.0 mL |
||
40805ES08 |
5×1 mL |
||
细胞类型:贴壁/悬浮 |
40806ES01 |
0.1 mL |
|
40806ES02 |
0.5 mL |
||
40806ES03 |
1.0 mL |
||
细胞类型:贴壁/悬浮 |
40808ES02 |
0.5 mL |
|
40808ES03 |
1 mL |
||
40808ES08 |
5×1 mL |
||
细胞类型:贴壁/悬浮 |
40809ES01 |
0.1 mL |
|
40809ES03 |
1 mL |
||
细胞类型:贴壁/悬浮 |
40815ES03 |
1 g |
|
40815ES08 |
5×1 g |
||
细胞类型:贴壁/悬浮 |
40816ES02 |
100 mg |
|
40816ES03 |
1 g |
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细胞类型:293 |
40820ES04 |
1.5 mL |
|
40820ES10 |
10 mL |
||
40820ES60 |
100 mL |
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细胞类型:293 核酸类型:DNA 用途:AAV/LV载体大规模生产 |
40821ES10 |
10 mL |
|
40821ES60 |
100 mL |
||
40821ES80 |
1 L |
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