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COA
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产品描述
本产品是2×Mix预混合试剂，能够实现在单个反应孔中进行多重荧光定量PCR。本产品含有基因改造的热启动Taq酶，极大地提高了扩增灵敏度和特异性，本产品对多重反应缓冲体系进行了深度优化，能够提高反应的扩增效率，促进低浓度模板的有效扩增。本产品可用于基因分型和基因多重定量分析。
产品组分
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组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
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11208ES03 (1 mL) |
11208ES06 (5 × 1mL) |
11208ES08 (5 mL) |
11208ES60 (20×5 mL) |
||
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11208-A |
2×Hieff Unicon® TaqMan Multiplex qPCR Master Mix |
1 mL |
5 × 1 mL |
5 mL |
20 × 5 mL |
|
11208-B |
50×Low Rox |
40 μL |
200 μL |
200 μL |
20 × 200 μL |
|
11208-C |
50×High Rox |
40 μL |
200 μL |
200 μL |
20 × 200 μL |
运输和保存方法
冰袋运输。-20°C储存，有效期18个月。
反应体系
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组分 |
体积（μL） |
终浓度 |
|
Hieff Unicon® TaqMan Multiplex qPCR Master Mix |
10 |
1× |
|
Primer mix |
x |
0.1-1 μM |
|
TaqMan Probe mix |
y |
50-300 nM |
|
50×Low or High Rox |
0.4 |
1× |
|
模板DNA/cDNA |
1-100 ng |
- |
|
ddH2O |
up to 20 |
- |
【注】
a. 上表中模板量和引物浓度以及探针浓度均为推荐量，可根据具体实验情况进行调整，选择最适投入量和浓度
b. 一般情况下，每条引物浓度为 0.2 μM 即可得到较好的扩增效果，引物浓度可在 0.1-1 μM 的范围内进行调节；
c. 反应体系可根据实验需求进行等比例调节，模板体积不超过总体积的 1/10。
适用机型
Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR.
参考扩增程序
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循环步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
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预变性 |
95°C |
5 min |
1 |
|
变性 |
95°C |
5 sec |
40 |
|
退火/延伸 |
60°C |
30 sec |
【注】
a. 某些情况下，可通过调节退火延伸时间提高多重 qPCR 反应的性能；
b. 反应结束后可通过琼脂糖凝胶电泳确认产物的特异性；
注意事项
1. 请于使用前确保产品完全解冻并彻底混匀，短暂离心收集至管底后置于冰上备用。
2. 为避免样品间交叉污染和气溶胶污染，推荐在超净台中进行反应体系的配制。
3. 使用过程中避免产品的反复冻融。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
HB220808
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