产品简介

 

phi29 DNA polymerase来源于Bacillus subtilis噬菌体，经基因工程改造后具有卓越的链置换和持续合成能力，可合成长达70 kb的DNA片段。此外其3’→5’核酸外切酶校读活性较强，推荐体系中引物3’末端修饰以防止降解，常用于质粒的体外合成和全基因组合成。

 

产品信息

 

货号	14404ES72 / 14404ES80 / 14404ES90
规格	250 U / 1,000 U /5,000 U
酶活定义	30℃条件下反应10 min，能使0.5 pmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀所需的酶量
热失活	65℃，10 min。

 

组分信息

 

组分编号	组分名称	14404ES72	14404ES80	14404ES90
14404-A	phi29 DNA Polymerase (10 U/μL）	25 μL	100 μL	500 μL
14404-B	10×phi29 Reaction Buffer	100 μL	400 μL	2×1 mL

 

储存条件

 

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用说明

 

以基因组DNA扩增为例

1. 反应体系配置

组分	用量
10×phi29 Reaction Buffer	2 μL
随机引物	总投入量20-75 μM
dNTPs	总投入量2 mM
基因组DNA	5-50 ng
ddH2O	to 19 μL

2. 将上述反应体系置于PCR仪中95℃孵育5 min，迅速置于冰浴2 min，使DNA模板变性*。

3. 向上述体系中加入1-2 μL phi29 DNA Polymerase (10 U/μL)，30-42℃孵育3 h**。

4. 65℃，10 min失活phi29 DNA polymerase。

*：基因组、质粒DNA等模板预变性可选。

**：该酶在42℃可达到最高扩增产量。

 

注意事项

 

1.Buffer在融解时，如果出现少量沉淀属正常现象，请颠倒混匀后使用。

2.本产品仅作科研用途。

3.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

 

Ver.CN20231204