产品描述
细胞纤连蛋白(fibronectin,FN)是一种细胞外糖蛋白,分别以可溶形式存在于体液中,或以不可溶形式存在于细胞外 基质中。作为主要的细胞粘附分子之一,FN 在许多重要的生理过程中起着关键性作用,如胚胎生成,伤口愈合,止血和血 栓形成。纤连蛋白表达的改变,降解以及组合与大量的病理发生密切相关,包括癌症和纤维化。
纤连蛋白(FN)的应用:1)作为细胞培养基质;功能在于促进细胞生长,提高细胞贴壁率,增强细胞代谢水平,缩短
细胞生长时间;杂交瘤技术中提高细胞融合率等。2)疾病诊断和治疗;功能在于伤口修复和愈合,癌症诊断和治疗,治疗
血管系统和心脑血管疾病等。
本产品是来源于水稻胚乳细胞的重组人纤连蛋白,以单体形式存在,可作为一种细胞培养基质,替换Matrigel、鼠尾胶原、血源纤连蛋白等,提高细胞贴壁率,增强细胞代谢水平,缩短细胞生长周期。也可直接添加到培养基中,替换或降低血清使用量,促进细胞贴壁、迁移、移动生长、维持细胞状态。
本品以冻干粉形式供货,为细胞培养级别,具有批次间差异小、无潜在病毒感染风险等特点。
产品性质
CAS号(CAS Number) |
86088-83-7 |
来源 |
水稻种子 |
外观(Appearance) |
白色冻干粉 |
分子量(Molecular Weight) |
200~210 kDa |
酸碱度(pH) |
6.0~8.0 |
活性(Potency) |
≥27.5 USP U/mg |
纯度(Purity ) |
≥95%(by SDS-PAGE); |
蛋白含量(Protein Content) |
≥1 mg |
内毒素(Endotoxin) |
< 0.5 EU/μg |
运输和保存方法
冰袋运输。冻干粉-20 ℃保存,2年以上有效。储存液-20 ℃保存,3~6个月有效。
【注】:开封后尽快使用,避免反复冻融。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)本产品仅作科研用途!
母液配制
用20mM 柠檬酸盐,250mM NaCl,pH7.2~7.4溶解重组人纤维连接蛋白(rFN),建议配置1 mg/mL 的储存液。母液按照单次使用剂量,分装冻存于-20 ℃,避免反复冻融。
使用方法(以6孔板为例,其他培养板加样体积请参考表1)
1.包被/铺板实验
1)取出适量的重组人纤维连接蛋白(rFN),用无菌1×PBS,pH 7.2~7.4稀释至工作液浓度,终浓度参考范围50~100 μg/mL。混匀后,加入到6孔板中,800 μL/孔,保证工作液完全覆盖6孔板底部。
2)将加有rFN工作液的6孔板,放置在4 ℃过夜或者37 ℃包被1 h。
3)收集6孔板中的工作液,放置4 ℃保存,一周内可用于其他培养瓶/板包被。
4)取出rFN包被后的6孔板,加入正常的细胞培养基后,可直接接种细胞,rFN促进细胞贴壁、生长等。
5)若包被后的6孔板暂不使用,放置在4 ℃密封保存,建议一周内使用完。
【注】:包被/铺板实验中,重组人纤维连接蛋白(rFN)工作液的加入量,应根据培养皿/瓶的大小进行调整,请参见下表1。
培养皿 |
底面积 (cm2) |
推荐rFN工作液加入量 |
96孔板 |
0.32 |
50 μL |
24孔板 |
2 |
200 μL |
12孔板 |
4.5 |
400 μL |
6孔板 |
9.6 |
800 μL |
35 mm培养皿 |
8 |
600 μL |
60 mm培养皿 |
21 |
1.6 mL |
25 cm2培养瓶 |
25~28 |
2.0 mL |
表1不同培养瓶/板包被时推荐 rFN加入量
2.细胞实验
细胞培养过程中,将rFN直接加入细胞培养基中,可促进细胞贴壁、迁移、维持细胞状态等。终浓度参考范围5~50 μg/mL。
HB20240918
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